[發(fā)明專(zhuān)利]R，S-告依春的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611022521.2
• 申請(qǐng)日: 2016-11-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106632120B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-03-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃啟吟;曾侖;連林生
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中山優(yōu)諾生物科技發(fā)展有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07D263/16
• 分類(lèi)號(hào): C07D263/16
• 代理公司: 廣州華進(jìn)聯(lián)合專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 萬(wàn)志香

本發(fā)明公開(kāi)了一種R，S?告依春的制備方法，所述制備方法為：S1.提?。喝“逅{(lán)根藥材為原料，蒸餾水超聲提取，溶劑萃取后濃縮得到主含R，S?告依春的提取物；S2.高速逆流色譜分離：提取物經(jīng)高速逆流色譜洗脫分離，接收流份，收集含有目標(biāo)產(chǎn)物的流份，得到R，S?告依春粗品；S3.正相柱層析分離:正相柱層析分離R，S?告依春粗品，得目標(biāo)物。利用所述方法制備的R，S?告依春質(zhì)量高，單次制備量大，并對(duì)樣品活性無(wú)影響，也無(wú)外加污染，產(chǎn)品可用于藥品，化妝品，保健品等。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種中藥有效成分的提取分離工藝領(lǐng)域，具體的，本發(fā)明涉及一種R，S-告依春的制備方法。

背景技術(shù)

R，S-告依春是板藍(lán)根中的一種有效活性成分，具有顯著的抗病毒活性。傳統(tǒng)的制備R，S-告依春的方法基本采用大孔樹(shù)脂柱分離，大多使用大孔樹(shù)脂柱分離層析、正相柱層析及反相柱層析聯(lián)用的方法，然而采用這種方法制備出的樣品得率低、制備量小、純度不高，無(wú)法進(jìn)行規(guī)?；闹苽?。此外，這種方法還存在污染大，耗時(shí)長(zhǎng)，成本高，且在制備過(guò)程中因使用到大量的吸附填料，使樣品原有的生物活性大打折扣，所得R，S-告依春活性降低，生產(chǎn)效益低下，不適合推廣使用。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，本發(fā)明在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種用高速逆流大量制備R，S-告依春的方法，利用所述方法制備R，S-告依春質(zhì)量高，單次制備量大，并對(duì)樣品活性無(wú)影響，也無(wú)外加污染，可用于藥品，化妝品，保健品等。

其技術(shù)方案如下：

一種制備R，S-告依春的方法，包括如下步驟：

S1.提?。喝“逅{(lán)根藥材為原料，蒸餾水超聲提取，溶劑萃取后濃縮得到主含R，S-告依春的提取物；

S2.高速逆流色譜分離：配置體積比為7～9：0.5～1.5：0.5～1.5：8～10的乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水的溶劑體系，所述溶劑體系包括作為固定相的上層和作為流動(dòng)相的下層，取適量所述流動(dòng)相溶解所述提取物，將所述溶劑體系泵入高速逆流色譜的色譜柱中，然后將溶解后的所述提取物泵入高速逆流色譜洗脫分離，并根據(jù)記錄儀得到的逆流色譜圖譜判定流份中是否含有R，S-告依春，收集含有R，S-告依春的流份，干燥得到R，S-告依春粗品，其中，所述高速逆流色譜的參數(shù)設(shè)置如下：轉(zhuǎn)速為300～500rpm，分離溫度為17～23℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為240～260nm，流動(dòng)相的流速為9～20ml/min；

S3.正相柱層析分離：以正相層析硅膠為填料、體積比為5～9：1～3的石油醚-乙酸乙酯為洗脫溶劑進(jìn)行正相柱層析所述分離R，S-告依春粗品，洗脫體積為15～25倍柱體積，所述R，S-告依春粗品與填料的質(zhì)量比為1:20～1:50，收集含有R，S-告依春的洗脫液，減壓蒸餾即得。

本發(fā)明采用高速逆流色譜分離R，S-告依春，由于高速逆流色譜不需要固體支撐體，R，S-告依春的分離僅依據(jù)其在固定相、流動(dòng)相中分配系數(shù)的不同就可實(shí)現(xiàn)，無(wú)需大量使用吸附填料，因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等，不僅使R，S-告依春能夠充分回收，回收的R，S-告依春更能保持其本來(lái)的特性，且由于被分離的R，S-告依春提取物與液態(tài)固定相之間能夠充分接觸，使得樣品的制備量大大提高。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，步驟S2所述乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水的混合溶液中乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水的體積比為9：1：1：9。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，步驟S2中所述固定相的保留值為80～90％。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，步驟S2中所述固定相的保留值為82.4％。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，步驟S2中所述流動(dòng)相的流速為10～15ml/min。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，步驟S2中所述轉(zhuǎn)速為400～500rpm。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，步驟S2中所述檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。