[發(fā)明專利]一種利用納豆菌發(fā)酵制備玉米肽的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611021559.8
• 申請日: 2016-11-21
• 公開（公告）號: CN107574213A
• 公開（公告）日: 2018-01-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳韋方
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西大學(xué)
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C12R1/07
• 代理公司: 深圳市興科達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司44260
• 代理人: 袁士林

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種微生物發(fā)酵技術(shù)，特別涉及一種利用納豆菌發(fā)酵制備玉米肽的方法。

背景技術(shù)

木薯廣泛栽培于熱帶與亞熱帶，是世界三大薯類之一。在我國熱帶地區(qū)，木薯是僅次于水稻、甘薯、甘蔗和玉米的第五大作物。木薯淀粉是平均鏈長度為23的支鏈淀粉，其顆粒呈球形或半球形，平均粒徑為17～20μm。通過水解反應(yīng)，木薯淀粉水解成含有醛基和羰基的淀粉糖，如葡萄糖、麥芽糖和低聚糖等。

木薯淀粉在點(diǎn)分行業(yè)常被用作碳源。除此之外，它還以原淀粉和各種變性淀粉兩大類型廣泛地應(yīng)用在食品、飲料、糖果、膠粘劑和膠水、紡織、造紙、藥品及化妝品和生物降解材料等方面。木薯的塊根中含30%的淀粉，而木薯干含有70%的淀粉，有“淀粉之王”的美譽(yù)。由于木薯與其他農(nóng)作物相比有不可比擬的優(yōu)勢：木薯的非糧食農(nóng)產(chǎn)品，對土質(zhì)的要求低，耐干旱、貧瘠，符合“不爭糧、不爭（食）油、不爭糖，充分利用邊際性土地（不適合種植糧、棉、油等作物的土地）”的國家糧食發(fā)展戰(zhàn)略；成本低，具有經(jīng)濟(jì)性。因此，作為可再生的生物質(zhì)資源，近年來，木薯淀粉在生物燃料的方面得到了廣泛的應(yīng)用與發(fā)展。

為減少高溫耗能，降低水解成本，本發(fā)明選用中溫型α-淀粉酶對木薯淀粉進(jìn)行水解，并確定酶水解的最佳工藝條件，為木薯淀粉在生物燃料中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種利用納豆菌發(fā)酵制備玉米肽的方法，以玉米蛋白粉為基質(zhì)，應(yīng)用納豆菌發(fā)酵法制備玉米肽，開發(fā)出玉米蛋白粉水解度高的方法。

為實(shí)現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

步驟1：用接種環(huán)挑取豆菌一環(huán)，置于裝有10mL無菌水的試管中充分混勻，制成懸濁液。取少量懸濁液，在斜面培養(yǎng)基平板上涂劃線后，置培養(yǎng)箱中在35℃恒溫條件下培養(yǎng)24h～45h，備用；

步驟2：從步驟1得到的斜面培養(yǎng)基平板上挑取菌種接入裝有100mL種子培養(yǎng)基的三角瓶中，在37℃、180r/min的條件下，搖床振蕩培養(yǎng)18h，制成107CFU/mL～108CFU/mL菌液，作為用于發(fā)酵玉米蛋白粉的納豆菌種子液，備用；

步驟3：向玉米蛋白粉中加入水配置成濃度為0.05kg/L的底液，水浸泡24h后，120℃蒸煮10min，取出冷卻至一定溫度，即得玉米蛋白粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的發(fā)酵原料，備用。

步驟4：取步驟3得到的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的發(fā)酵原料，接入步驟2得到的體積分?jǐn)?shù)為3%的納豆菌液，置于培養(yǎng)箱中，在一定40℃下發(fā)酵水解。達(dá)到72h后，取出置100℃水浴中加熱10min滅酶，然后迅速冷卻至室溫，4000r/min離心10min得上清液，即蛋白水解液。

有益效果：以玉米蛋白粉為基質(zhì)，應(yīng)用納豆菌發(fā)酵制備玉米肽，在此條件下發(fā)酵，玉米蛋白粉的水解度可達(dá)到11.17%，該方法工藝操作簡單，成本低，市場前景良好，適于推廣應(yīng)用。

附圖說明

無。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。

我們采用本發(fā)明公開的方法，進(jìn)行以下操作：

（1）用接種環(huán)挑取豆菌一環(huán)，置于裝有10mL無菌水的試管中充分混勻，制成懸濁液。取少量懸濁液，在斜面培養(yǎng)基平板上涂劃線后，置培養(yǎng)箱中在35℃恒溫條件下培養(yǎng)24h～45h，備用；

（2）從（1）得到的斜面培養(yǎng)基平板上挑取菌種接入裝有100mL種子培養(yǎng)基的三角瓶中，在37℃、180r/min的條件下，搖床振蕩培養(yǎng)18h，制成107CFU/mL～108CFU/mL菌液，作為用于發(fā)酵玉米蛋白粉的納豆菌種子液，備用；

（3）向玉米蛋白粉中加入水配置成濃度為0.05kg/L的底液，水浸泡24h后，120℃蒸煮10min，取出冷卻至一定溫度，即得玉米蛋白粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的發(fā)酵原料，備用。

（4）取（3）得到的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的發(fā)酵原料，接入（2）得到的體積分?jǐn)?shù)為3%的納豆菌液，置于培養(yǎng)箱中，在一定40℃下發(fā)酵水解。達(dá)到72h后，取出置100℃水浴中加熱10min滅酶，然后迅速冷卻至室溫，4000r/min離心10min得上清液，即蛋白水解液。

結(jié)果顯示，以玉米蛋白粉為基質(zhì)，應(yīng)用納豆菌發(fā)酵制備玉米肽，在此條件下發(fā)酵，玉米蛋白粉的水解度可達(dá)到11.17%。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的思想和原則之內(nèi)，所做的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。