[發明專利]一種枯草芽孢桿菌ZC1發酵豆粕制備大豆肽的方法在審

申請號：	201611019459.1	申請日：	2016-11-21
公開（公告）號：	CN107574203A	公開（公告）日：	2018-01-12
發明（設計）人：	盧海鳳	申請（專利權）人：	廣西大學
主分類號：	C12P21/00	分類號：	C12P21/00;C12R1/125
代理公司：	深圳市興科達知識產權代理有限公司44260	代理人：	袁士林
地址：	530004 廣西壯族***	國省代碼：	廣西;45
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種枯草芽孢桿菌 zc1 發酵豆粕制備大豆方法
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及一種微生物發酵技術，特別涉及一種枯草芽孢桿菌ZC1發酵豆粕制備大豆肽的方法。

背景技術

大豆豆粕作為一種功能飼料，在飼料加工行業中得到廣泛應用，但是豆粕中也含有許多抗營養因子，不利于人體吸收，甚至對生長健康有一定的影響，因此需要改善大豆豆粕的品質。枯草芽孢桿菌作為一種常見細菌，被國家首先列為工業發酵模式菌株，它能發酵豆粕，水解大豆蛋白生成人體易吸收的小分子肽及氨基酸，還能去除某些抗營養因子，減輕豆腥味。枯草芽孢桿菌發酵生產的大豆肽還具有一定抗氧化、降血糖、降血脂、增強機體免疫力等功能，所以在功能食品、保健食品和醫藥等行業具有一定的應用前景。張蕾等通過對枯草芽孢桿菌BSD-2發酵培養及優化，得到高產抗菌肽的培養基為蛋白胨14.29g/L、淀粉14.07g/L、豆餅粉6.49g/L、CaCO₃2.0g/L、MgSO₄1.0g/L，抗菌肽產量為原來的1.77倍。范遠景等研究枯草芽孢桿菌發酵豬血粉制備豬血多肽，得到最佳發酵工藝參數為：溫度30℃、轉速160r/min、初始pH值7.5、接種量6%、發酵時間50h。劉心鳳等研究枯草芽孢桿菌BSG1產蛋白酶條件，優化得到最佳培養基為大豆粉2%、玉米粉1%、硫酸鎂0.6%、最佳培養調價為培養基起始pH7.0、搖瓶裝液量150/500mL、接種量5%、搖床轉速280r/min、35℃發酵24h，在這條件下蛋白酶酶活為優化前的1.13倍。

本發明在搖瓶條件下，對谷草芽孢桿菌ZC1產大豆肽的培養基進行優化；在此基礎上進行10L發酵罐發酵，對枯草芽孢桿菌ZC1發酵豆粕產大豆肽的工藝條件進行優化，得到的大豆肽產品純度較高，且降低了生產成本。

本發明采用黑曲霉通過麩皮發酵后能夠產生外切蛋白酶：酸性蛋白酶，所以能用來脫苦大豆肽，效果良好。

發明內容

本發明的目的是提供一種黑曲霉脫苦大豆肽的方法，脫苦前后大豆肽分子量的變化較小，而苦味值明顯下降。

為實現上述的目的，本發明采用的技術方案為：

（1）制作培養基：

枯草芽孢桿菌ZC1高濃度基質培養基：豆粕粉25g/L、葡萄糖6g/L、氯化鈉8g/L；

基礎發酵產大豆肽培養基：豆粕粉60g/L、麥芽糖15g/L、磷酸二氫鉀8.52g/L。

（2）制作種子液：從步驟（1）活化好的斜面中挑取一到兩環枯草芽孢桿菌ZC1菌種到豆粕培養基中，在溫度37℃、搖床轉速200r/min、初始pH7.5、接種量4%的條件下，培養18h。

（3）將步驟（2）中得到的種子液放入10L的發酵罐中，發酵罐攪拌速率150r/min、通氣量5L/min、發酵溫度37℃、添加60mL植物油，保持48h。

（4）將步驟（3）中發酵后的大豆肽進行分離、過濾、真空濃縮、噴霧干燥、篩分，得到大豆肽產品。

本發明采用枯草芽孢桿菌ZC1發酵豆粕來制備大豆肽，中性蛋白酶和大豆肽轉化率可分別達到852.5U/mL和76.73%，大豆肽產品的純度較高，具有良好的應用價值。