[發(fā)明專(zhuān)利]一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)含共軛亞油酸發(fā)酵物的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611019128.8
• 申請(qǐng)日: 2016-11-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106755147B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-03-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張?jiān)瓷?/a>;王瑩
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣東利生源生物飼料有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12P7/64
• 分類(lèi)號(hào): C12P7/64;C12R1/225;C12R1/865
• 代理公司: 韶關(guān)市雷門(mén)專(zhuān)利事務(wù)所 44226
• 代理人: 周勝明

本發(fā)明涉及一種微生物發(fā)酵共軛亞油酸的制備方法，該方法包括以下步驟：配制發(fā)酵基質(zhì)，菌種的擴(kuò)培，菌液的混合，滾筒發(fā)酵后進(jìn)行烘干得到含有共軛亞油酸≥6.0%的發(fā)酵產(chǎn)物。它能夠解決目前天然共軛亞油酸數(shù)量和品質(zhì)難以滿(mǎn)足日常的使用需求，具有轉(zhuǎn)化率高、產(chǎn)量較大、應(yīng)用廣發(fā)等特點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物飼料發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)含共軛亞油酸發(fā)酵物的制備方法。

背景技術(shù)

共軛亞油酸(Conjugated linoleic acid ，CLA)是由必需脂肪酸亞油酸衍生的共軛雙烯酸的多種位置和幾何異構(gòu)體的總稱(chēng)。CLA是一種非常令人感興趣的營(yíng)養(yǎng)添加劑，已大量用于農(nóng)業(yè)和食品工業(yè)。目前，盡管對(duì)CLA 的功能尚未有完整的了解，但CLA 已被證實(shí)具有重要的生理功能，包括抗癌，降低血液和肝臟膽固醇，強(qiáng)化免疫，促生長(zhǎng)，改善肉品質(zhì)，抑制脂肪沉積等。具有活性的CLA異構(gòu)體主要存在于反芻（瘤胃）動(dòng)物的乳脂及肉制品中，含量甚微(每克乳脂中含CLA 2～25 mg) ，難以富集，而且多種異構(gòu)體并存，難以純化。普通植物油中幾乎不含CLA ，只有在一些稀有植物種子中發(fā)現(xiàn)有共軛多烯酸的存在，但未發(fā)現(xiàn)具有生理活性的異構(gòu)體的存在。目前，CLA 作為一種天然的功能性脂肪酸被廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)中，具有減少體脂、提高動(dòng)物生產(chǎn)性能、改善胴體品質(zhì)等特殊生理功能，在畜禽生產(chǎn)中受到高度重視。

天然CLA 主要存在于反芻動(dòng)物的乳脂及其肉制品中，是亞油酸和亞麻酸在瘤胃微生物作用下發(fā)生氫化反應(yīng)然后在去飽和酶作用下生成的。在一些植物中也發(fā)現(xiàn)了CLA 的存在，但是含量非常少，動(dòng)物產(chǎn)品中所含的CLA 較植物油中多。在動(dòng)物中，反芻動(dòng)物組織中CLA含量較非反芻動(dòng)物組織高。

天然CLA 的數(shù)量難以滿(mǎn)足日常的使用需求，因此大量研究者通過(guò)其他方法合成能夠使用的CLA。CLA 的化學(xué)合成一般以亞油酸或富含油酸、亞油酸的植物油( 如脫水蓖麻油、紅花油、亞麻油、棉籽油、玉米胚芽油和葵花籽油) 為原料，采用生物化學(xué)的方法進(jìn)行誘導(dǎo)異構(gòu)化，可得到多種異構(gòu)體的混合物，主要為cis- trans、trans - cis 異構(gòu)體和少量的cis - cis、trans - trans 異構(gòu)體。化學(xué)合成法的缺點(diǎn)是合成的CLA 是多種異構(gòu)體的混合物，難以分離、純化得到單個(gè)異構(gòu)體，這也限制了產(chǎn)品的應(yīng)用。因此，尋求一種新的方法替代化學(xué)合成。與化學(xué)合成相比，微生物發(fā)酵法的優(yōu)點(diǎn)是反應(yīng)條件溫和，可以得到較單一的異構(gòu)體，與天然食物中CLA 異構(gòu)體組成相似，安全性較高，有利于產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)應(yīng)用。

目前常用于微生物發(fā)酵產(chǎn)共軛亞油酸的菌株有乳酸菌、丁酸弧菌、瘤胃菌、丙酸桿菌、雙歧桿菌等。這些菌株在合適的基料中培養(yǎng)，然后在一定條件下轉(zhuǎn)化亞油酸生成CLA，這緣于所篩選的菌株在生長(zhǎng)過(guò)程中可產(chǎn)生亞油酸異構(gòu)酶，該酶具有專(zhuān)一性，能將底物亞油酸轉(zhuǎn)化為特定的、比較純的活性異構(gòu)體，所以利用乳酸菌等微生物來(lái)生產(chǎn)CLA 具有非常重大的意義。然而微生物發(fā)酵產(chǎn)共軛亞油酸方法的缺點(diǎn)是生產(chǎn)CLA 的菌株大多數(shù)為嚴(yán)格厭氧菌，在工業(yè)或?qū)嶒?yàn)室中不易培養(yǎng)且產(chǎn)量較低，難以廣泛應(yīng)用；過(guò)量的游離亞油酸和副產(chǎn)物的生成會(huì)抑制產(chǎn)CLA 菌株的生長(zhǎng)，從而影響其轉(zhuǎn)化率；亞油酸在水中的溶解度低，會(huì)阻礙轉(zhuǎn)化效率。因此，需要尋找新的發(fā)酵方法解決現(xiàn)有的技術(shù)以及已有專(zhuān)利存在的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的上述缺點(diǎn)，本發(fā)明提供一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)含共軛亞油酸發(fā)酵物的制備方法，它能夠解決目前天然共軛亞油酸數(shù)量難以滿(mǎn)足日常的使用需求，具有轉(zhuǎn)化率高、產(chǎn)量較大、應(yīng)用廣發(fā)等特點(diǎn)。

本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是：一種微生物發(fā)酵生產(chǎn)含共軛亞油酸發(fā)酵物的制備方法，其制備步驟是：

（1）配制發(fā)酵基質(zhì)：選取適量的米糠、大豆粉及大米粉，并將各原料通過(guò)95 kw隧道式微波機(jī)進(jìn)行微波處理，微波時(shí)間為4 min，冷卻后再用1.0mm篩片的粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎制得發(fā)酵基質(zhì)；