[發明專利]一種抗平滑肌抗體IgG化學發光免疫檢測試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 201611018728.2
• 申請日: 2016-11-21
• 公開（公告）號: CN106855569A
• 公開（公告）日: 2017-06-16
• 發明（設計）人: 王剛;程德淑;周羽;劉星;謝納
• 申請（專利權）人: 深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/531
• 分類號: G01N33/531;G01N33/576;G01N21/76
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種抗平滑肌抗體IgG化學發光免疫檢測試劑盒，所述試劑盒包括：平滑肌抗原包被的納米磁微球、化學發光標記物、化學發光底物液、抗平滑肌抗體IgG定標品。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述平滑肌抗原包被的固相載體為磁微粒。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述平滑肌抗原包被的固相載體為羧基化的粒徑為0.05-1μm磁微粒。

4.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述化學發光標記物為吖啶酯、吖啶酯磺酰胺、吖啶酯甲苯磺酰胺、吖啶酯對甲基磺酰胺、吖啶酯三氟甲基磺酰胺。

5.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述化學發光標記物優選吖啶酯。

6.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述化學發光底物液包括化學發光激發液、化學發光預激發液。

7.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述化學發光預激發液為質量分數0.005% ~ 0.5%的雙氧水(H₂O₂)溶液，激發液為0.005mol/L~0.025mol/L的氫氧化鈉(NaOH)溶液。

8.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述抗平滑肌抗體IgG定標品為用標準品緩沖液將抗平滑肌抗體IgG配制成濃度為0.05COI和5COI，4℃保存備用。

9.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的制備方法，其特征在于包括平滑肌抗原包被的磁微粒的制備、鼠抗人IgG抗體標記的吖啶酯的制備、化學發光底物液的制備、抗平滑肌抗體IgG定標品的制備。

10.根據權利要求1和權利要求9所述試劑盒的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1）平滑肌抗原包被的磁微粒的制備：

取羧基化的納米磁珠懸浮液，磁分離去上清，MES緩沖液重懸，加入EDC水溶液，活化磁珠表面羧基，加入平滑肌抗原，室溫下混懸2-10h，磁分離，去除上清，Tris緩沖液重懸，得到平滑肌抗原包被的磁微粒；可選的，羧基化納米磁珠直徑為0.1μm~2.0μm；MES緩沖液濃度為10mM ~ 100mM，pH 5.5 ~ 8.5；

2）鼠抗人IgG抗體標記的吖啶酯的制備：

取鼠抗人IgG抗體，加入碳酸鹽緩沖液，混勻，然后加入吖啶酯混勻，室溫下避光反應，1-2h后取出，離心脫鹽柱脫鹽處理，脫鹽過程中首先分別用純凈水及TBS緩沖液進行處理，最后加入得到的鼠抗人IgG抗體標記的吖啶酯溶液，收集離心管中的液體至保存管得到鼠抗人IgG抗體標記的吖啶酯；

3）抗平滑肌抗體IgG定標品的制備：

用標準品緩沖液將抗平滑肌抗體IgG配制成0.05COI 和5COI的樣品，分裝成1.0mL的小包裝，4 ℃保存備用；

4）化學發光預激發液的制備：

量取1.0升純化水，依次加入0.5 ~100μL質量分數為20%的雙氧水(H₂O₂)、0.5 ~ 5克防腐劑、0.5 ~ 5克表面活性劑，搖勻后避光存放；可選的，防腐劑為商品化疊氮化鈉、PC300，表面活性劑為吐溫20、吐溫80、Triton X-100、Triton X-405；

5）化學發光激發液的制備：

量取1.0升純化水，依次加入0.2~1克氫氧化鈉、0.5~5克防腐劑、0.5~5克表面活性劑，搖勻后避光存放；可選的，防腐劑為商品化疊氮化鈉、PC300，表面活性劑為吐溫20、吐溫80、Triton X-100、Triton X-405。