[發明專利]洛塞那肽及其類似物的制備方法

有效

• 申請號: 201611013498.0
• 申請日: 2016-11-17
• 公開（公告）號: CN108070030B
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 周明;朱后田;袁恒立;王生斌;張豐盈
• 申請（專利權）人: 江蘇豪森藥業集團有限公司
• 主分類號: C07K14/575
• 分類號: C07K14/575;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

1.洛塞那肽的制備方法，其特征在于：

1）以氨基樹脂為原料，加入脫保護劑，脫除氨基樹脂的保護基；

2）將上步所得的樹脂，采用逐一縮合的方式，按照洛塞那肽的肽序依次連接帶有保護基的氨基酸，縮合反應包括加入縮合劑，加入有機堿；

3）加入脫保護劑至步驟2所得產物中，脫除氨基酸的Fmoc保護基，得到洛塞那肽的樹脂肽；

4）上述步驟3）所得的樹脂肽經裂解液處理，去除樹脂和保護基，得到相應肽的粗品；

5）粗品經純化、凍干得精品；

步驟1）中所述氨基樹脂為Rink?Amide-AM樹脂；

步驟2）中的縮合試劑為3-(二乙氧基鄰酰氧基)-1,2,3-苯并三嗪-4-酮，有機堿為N,N-二異丙基乙胺；

步驟2）的縮合溫度為10~30℃；

步驟4）中裂解液選自三氟乙酸、1,2-乙二硫醇、三異丙基硅烷和水組成的混合物或者選自三氟乙酸、二硫蘇糖醇、三異丙基硅烷和水組成的混合物；

步驟4）中裂解液與洛塞那肽樹脂肽的體積重量比8~15:1。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述洛塞那肽樹脂肽結構為：

His(R)-D-Ala-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(trt)-Nle-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-

Arg(pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Gln(trt)-Gly-Gly-Pro-

Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Cys(trt)-?氨基樹脂，其中R為Fmoc、Boc或Trt。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1）中所述氨基樹脂載量為0.2~1.5mmol/g。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1）中所述氨基樹脂載量為0.5~1.0?mmol/g。

5.根據權利要求1-3任一項所述的制備方法，其特征在于，氨基酸與樹脂的投料摩爾比為2：1~6:1。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟4）中裂解液中三氟乙酸：1,2-乙二硫醇或二硫蘇糖醇：三異丙基硅烷：水的質量比為85~94:2~5:2~5:2~5。

7.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟4）中裂解反應時間為1~5小時。

8.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟4）中裂解反應時間為為2~4小時。

9.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟5）中洛塞那肽粗品使用高效液相反相純化方法。

10.根據權利要求9所述的制備方法，其特征在于，

制備柱填料；C¹⁸/C⁸類填料；

純化流動相：流動相A：磷酸鹽水溶液，PH范圍2.0~7.0；流動相B：乙腈或甲醇；

脫鹽流動相：流動相C：水或三氟乙酸水溶液，濃度0~0.5%；流動相D：乙腈或三氟乙酸乙腈溶液，濃度0~0.5%。