[發(fā)明專(zhuān)利]一種嘉蘭百合快速繁殖的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611000512.3
• 申請(qǐng)日: 2016-11-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106718873A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 段青;王祥寧;蔣亞蓮;崔光芬;賈文杰;馬璐琳;杜文文
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 昆明正原專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司53100
• 代理人: 徐玲菊,于洪

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物組培技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種嘉蘭百合快速繁殖的方法。

背景技術(shù)

嘉蘭百合(Gloriosa superba Linn)屬百合科嘉蘭屬攀援性草本植物，原產(chǎn)于我國(guó)云南省南部、海南省及亞洲非洲熱帶地區(qū)，我國(guó)云南西雙版納海拔1200m以下有野生零星分布。花姿奇特，猶如燃燒的火焰，色彩艷麗而高雅；花色變幻多樣，花期較長(zhǎng)，是一種極具觀(guān)賞價(jià)值的草本花卉。因富含秋水仙堿，其塊莖是生產(chǎn)秋水仙堿的理想原料之一。嘉蘭百合的繁殖方式有種子繁殖、塊莖無(wú)性繁殖和組培繁殖。由于嘉蘭百合的種子繁殖困難且生長(zhǎng)緩慢，需3~4年才能開(kāi)花，通常采用其地下塊莖進(jìn)行無(wú)性繁殖。然而，嘉蘭百合的繁殖系數(shù)非常低，每株只能形成1個(gè)塊莖，每個(gè)塊莖只有2個(gè)芽，嚴(yán)重制約了嘉蘭百合的規(guī)模化生產(chǎn)。采用常規(guī)組培繁殖技術(shù)生產(chǎn)的組培苗，則面臨著過(guò)渡移栽成活率低，且后期生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)周期長(zhǎng)等問(wèn)題。也由于嘉蘭百合是百合科嘉蘭屬，而常見(jiàn)的百合品種是百合科百合屬，由于不是一個(gè)屬的植物，其繁殖差異極大，不具有參考價(jià)值。因此以常規(guī)的繁殖方法難以滿(mǎn)足嘉蘭百合的規(guī)模化快速生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)嘉蘭百合種子繁殖困難、塊莖繁殖系數(shù)低、組培繁殖移栽后期生長(zhǎng)緩慢、時(shí)間長(zhǎng)等問(wèn)題，本發(fā)明提供一種嘉蘭百合快速繁殖的方法，通過(guò)改進(jìn)生產(chǎn)流程和培養(yǎng)基配方，提高嘉蘭百合繁殖系數(shù)，快速生產(chǎn)大量?jī)?yōu)質(zhì)塊莖，以滿(mǎn)足優(yōu)質(zhì)種苗的大規(guī)模生產(chǎn)需要。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種嘉蘭百合快速繁殖的方法，包括如下步驟：

A、外植體的選擇與滅菌：選取生長(zhǎng)健壯且未形成花芽的莖尖和/或腋芽為外植體，剝?nèi)ネ鈱尤~片，切成長(zhǎng)為1.5~2.0cm的小段，清洗干凈并消毒，然后用無(wú)菌水漂洗至無(wú)消毒劑殘留；

B、不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)：將經(jīng)過(guò)A步驟消毒滅菌后的小段接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為27±2℃，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，日光照時(shí)間為10～12h/d的條件下，誘導(dǎo)培養(yǎng)20~40d直至外植體萌發(fā)分化出0.5~1.5cm長(zhǎng)的不定芽；

所述的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基+6.0mg/L~8.0mg/L 6-芐氨基嘌呤+0.01mg/L~0.05mg/L萘乙酸+6.5g/L~7.0g/L瓊脂+30g/L蔗糖，pH5.8~6.0；

C、不定芽繼代增殖培養(yǎng)：將B步驟的不定芽在無(wú)菌條件下切下置于增殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為27±2℃，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，日光照時(shí)間為10～12h/d的條件下進(jìn)行繼代培養(yǎng)，獲得帶有莖盤(pán)的不定芽；

所述的增殖培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基+4.0mg/L~5.0mg/L 6-芐氨基嘌呤+0.05mg/L~0.1mg/L萘乙酸+瓊脂6.5g/L~7.0g/L+蔗糖30g/L，pH5.8~6.0；

D、塊莖培養(yǎng)：將C步驟獲得的帶有莖盤(pán)的不定芽在無(wú)菌條件下切成不定芽和莖盤(pán)兩部分，切下的不定芽返回接種至C步驟的增殖培養(yǎng)基中，再次進(jìn)行繼代培養(yǎng)；而切下的莖盤(pán)去除根、莖、葉后，將其分割成2~4塊接種至塊莖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為27±2℃，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，日光照時(shí)間為10～12h/d的條件下進(jìn)行塊莖培養(yǎng)50~60d，待塊莖長(zhǎng)至直徑1.0~1.5cm即可出瓶下地種植；

所述的塊莖培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基+1.0mg/L~1.5mg/L 6-芐氨基嘌呤+0.1mg/L~0.5mg/L萘乙酸+6.5g/L~7.0g/L瓊脂+60g/L蔗糖，pH5.8~6.0；

E、移栽：將D步驟出瓶的塊莖按常規(guī)洗凈塊莖上的培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為0.1～0.2%的多菌靈溶液中消毒1～2min后，移栽至質(zhì)量比為紅土：腐葉土=1︰1的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)中，需40%~45%的遮陰度，按常規(guī)進(jìn)行澆水、施肥管理，生長(zhǎng)40~60d后發(fā)芽出苗，即可得到嘉蘭百合種苗。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，步驟A中所述的清洗和消毒的具體方法是用常規(guī)的加有洗滌劑的水清洗后，在質(zhì)量濃度為0.1%的升汞溶液中消毒7~10min，再在質(zhì)量濃度為0.3%的次氯酸鈉溶液中消毒3~5min，然后用無(wú)菌水漂洗3~4次。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述的繼代周期為20~30d，繼代3~5代，可獲得大量帶有莖盤(pán)的不定芽。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，步驟D中，切下的莖盤(pán)去除根、莖、葉后，將其分割成2~4塊，每塊粒徑為0.3~0.5c

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其有益效果為：