[發(fā)明專利]一種嘉蘭百合快速繁殖的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611000512.3
• 申請日: 2016-11-14
• 公開（公告）號: CN106718873A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 段青;王祥寧;蔣亞蓮;崔光芬;賈文杰;馬璐琳;杜文文
• 申請（專利權(quán)）人: 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 昆明正原專利商標(biāo)代理有限公司53100
• 代理人: 徐玲菊,于洪

1.一種嘉蘭百合快速繁殖的方法，其特征在于，包括如下步驟：

A、外植體的選擇與滅菌：選取生長健壯且未形成花芽的莖尖和/或腋芽為外植體，剝?nèi)ネ鈱尤~片，切成長為1.5~2.0cm的小段，清洗干凈并消毒，然后用無菌水漂洗至無消毒劑殘留；

B、不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)：將經(jīng)過A步驟消毒滅菌后的小段接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為27±2℃，光照強度為2000～3000lx，日光照時間為10～12h/d的條件下，誘導(dǎo)培養(yǎng)20~40d直至外植體萌發(fā)分化出0.5~1.5cm長的不定芽；

所述的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基+6.0mg/L~8.0mg/L 6-芐氨基嘌呤+0.01mg/L~0.05mg/L萘乙酸+6.5g/L~7.0g/L瓊脂+30g/L蔗糖，pH5.8~6.0；

C、不定芽繼代增殖培養(yǎng)：將B步驟的不定芽在無菌條件下切下置于增殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為27±2℃，光照強度為2000～3000lx，日光照時間為10～12h/d的條件下進行繼代培養(yǎng)，獲得帶有莖盤的不定芽；

所述的增殖培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基+4.0mg/L~5.0mg/L 6-芐氨基嘌呤+0.05mg/L~0.1mg/L萘乙酸+瓊脂6.5g/L~7.0g/L+蔗糖30g/L，pH5.8~6.0；

D、塊莖培養(yǎng)：將C步驟獲得的帶有莖盤的不定芽在無菌條件下切成不定芽和莖盤兩部分，切下的不定芽返回接種至C步驟的增殖培養(yǎng)基中，再次進行繼代培養(yǎng)；而切下的莖盤去除根、莖、葉后，將其分割成2~4塊接種至塊莖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為27±2℃，光照強度為2000～3000lx，日光照時間為10～12h/d的條件下進行塊莖培養(yǎng)50~60d，待塊莖長至直徑1.0~1.5cm即可出瓶下地種植；

所述的塊莖培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基+1.0mg/L~1.5mg/L 6-芐氨基嘌呤+0.1mg/L~0.5mg/L萘乙酸+6.5g/L~7.0g/L瓊脂+60g/L蔗糖，pH5.8~6.0；

E、移栽：將D步驟出瓶的塊莖按常規(guī)洗凈塊莖上的培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為0.1～0.2%的多菌靈溶液中消毒1～2min后，移栽至質(zhì)量比為紅土：腐葉土=1︰1的營養(yǎng)基質(zhì)中，需40%~45%的遮陰度，按常規(guī)進行澆水、施肥管理，生長40~60d后發(fā)芽出苗，即可得到嘉蘭百合種苗。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的嘉蘭百合快速繁殖的方法，其特征在于，步驟A中所述的清洗和消毒的具體方法是用常規(guī)的加有洗滌劑的水清洗后，在質(zhì)量濃度為0.1%的升汞溶液中消毒7~10min，再在質(zhì)量濃度為0.3%的次氯酸鈉溶液中消毒3~5min，然后用無菌水漂洗3~4次。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的嘉蘭百合快速繁殖的方法，其特征在于，所述的繼代周期為20~30d，繼代3~5代，可獲得大量帶有莖盤的不定芽。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的嘉蘭百合快速繁殖的方法，其特征在于，步驟D中，切下的莖盤去除根、莖、葉后，將其分割成2~4塊，每塊粒徑為0.3~0.5cm。