[發明專利]一種遼刺參低聚肽輔助降血糖功能的研究方法

在審

• 申請號: 201610998707.5
• 申請日: 2016-11-14
• 公開（公告）號: CN108066367A
• 公開（公告）日: 2018-05-25
• 發明（設計）人: 黃祥賢
• 申請（專利權）人: 大連豪翔生物酶工程有限公司
• 主分類號: A61K35/616
• 分類號: A61K35/616;A61K49/00;A61P3/10;G01N33/48
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• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種遼刺參低聚肽輔助降血糖功能的研究方法，屬于生物科技技術領域。具體步驟如下：小鼠糖尿病模型建立及降血糖試驗；糖尿病小鼠各項指標檢測；臟器系數計算；血清一氧化氮合酶活力測定；血清一氧化氮含量測定；血清超氧化物歧化酶活力測定；血清丙二醛含量測定；統計學處理：用SPSS22.0軟件進行顯著性分析，結果用表示。本發明研究方法表明，遼刺參低聚肽不僅對四氧嘧啶誘導的糖尿病小鼠血糖升高有一定的輔助治療作用，而且還能顯著改善糖尿病小鼠體內抗氧化能力，有效清除自由基，提高體內抗氧化酶的活力，預防糖尿病并發癥的發生，為海參低聚肽對糖尿病輔助降血糖方面產品的開發利用提供理論依據。

技術領域：

本發明涉及一種遼刺參低聚肽輔助降血糖功能的研究方法，屬于生物科技技術領域。

背景技術：

糖尿病是嚴重危害人類健康的疾病之一，隨著全球老齡化趨勢加劇，發病率呈逐年上升趨勢。因此，安全可靠又方便易行的方法來控制血糖，對糖尿病的預防和治療顯得尤為重要。

海參是棘皮動物門海參綱所有生物的統稱，現存種有1100多種，有近300種海參已被商業開發，我國現有海參種類有160多種。刺參(Apostichopus japonicus)分布在中國的江蘇連云港以北海域，是中國20多種食用海參中質量最好的一種[3]。其中，遼刺參又被認為是傳統的中醫滋補品，海參中的極品。早在明代的《食物本草》中就指出海參有主補元氣、滋益五臟六腑和袪虛損的養生功能。

海參低聚肽是海參精深加工的產品，具有良好的溶解性、穩定性，安全性(與普通海參制品相比，海參低聚肽肽無抗原性)。研究顯示，海參低聚肽具有降血壓、抗氧化、提高免疫力、抗衰老等諸多功能，但是海參低聚肽降血糖相關方面的研究鮮有報道。

發明內容：

針對上述問題，本發明要解決的技術問題是提供一種遼刺參低聚肽輔助降血糖功能的研究方法。

本發明的遼刺參低聚肽輔助降血糖功能的研究方法，具體步驟如下：

(1)小鼠糖尿病模型建立及降血糖試驗：選擇實驗對象為昆明種小鼠，雄性，體重20±2g，禁食不禁水12h后，小鼠腹腔按照160mg/kg注射四氧嘧啶；經過5d自由飲食后，禁食不禁水12h，測血糖值，選用血糖值在10mmol/L以上的小鼠50只，隨機分成陰性對照組、陽性對照組和遼刺參低聚肽組，每組10只，自由采食；按照人體推薦用量的20倍、10倍和5倍分別作為遼參低聚肽高、中、低劑量組的灌胃劑量，依次為0.05g/kg、0.017g/kg、0.0085g/kg，其中陽性對照組灌胃雙胍水溶液，劑量為0.05g/kg，各組小鼠每日灌胃1次，連續灌胃42d，自由進食、飲水，每天記錄小鼠進食量和飲水量，每兩周稱體重，禁食12h后測量血糖值，末次灌胃后對小鼠進行眼球取血，離心取血清備用，斷頸處死；

(2)糖尿病小鼠各項指標檢測：從實驗開始每天記錄小鼠攝食量、飲水量和體重，每兩周尾尖取血測血糖一次；

(3)臟器系數計算：末次灌胃結束后，眼球取血后處死，解剖分別取胸腺和脾臟，觀察臟器之間的粘連程度后，稱重計算胸腺與脾臟的臟器系數；

胸腺系數＝胸腺平均重量(mg)/小鼠平均體重(g)；

脾臟系數＝脾臟平均重量(mg)/小鼠平均體重(g)；

(4)血清一氧化氮合酶活力測定：按南京建成生物工程研究所的一氧化氮合酶(NOS)試劑盒(A014-2)說明書對小鼠的血清進行檢測操作，測定原理：NOS催化L-Arg和分子氧化反應生成NO，NO與親核性物質生成有色化合物，在530nm波長測定吸光度，根據吸光度的大小可計算出NOS活力；