[發(fā)明專利]一種遼刺參低聚肽輔助降血糖功能的研究方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201610998707.5
• 申請日: 2016-11-14
• 公開（公告）號: CN108066367A
• 公開（公告）日: 2018-05-25
• 發(fā)明（設計）人: 黃祥賢
• 申請（專利權）人: 大連豪翔生物酶工程有限公司
• 主分類號: A61K35/616
• 分類號: A61K35/616;A61K49/00;A61P3/10;G01N33/48
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種遼刺參低聚肽輔助降血糖功能的研究方法，其特征在于：所述的研究方法具體步驟如下：(1)小鼠糖尿病模型建立及降血糖試驗：選擇實驗對象為昆明種小鼠，雄性，體重20±2g，禁食不禁水12h后，小鼠腹腔按照160mg/kg注射四氧嘧啶；經過5d自由飲食后，禁食不禁水12h，測血糖值，選用血糖值在10mmol/L以上的小鼠50只，隨機分成陰性對照組、陽性對照組和遼刺參低聚肽組，每組10只，自由采食；按照人體推薦用量的20倍、10倍和5倍分別作為遼參低聚肽高、中、低劑量組的灌胃劑量，依次為0.05g/kg、0.017g/kg、0.0085g/kg，其中陽性對照組灌胃雙胍水溶液，劑量為0.05g/kg，各組小鼠每日灌胃1次，連續(xù)灌胃42d，自由進食、飲水，每天記錄小鼠進食量和飲水量，每兩周稱體重，禁食12h后測量血糖值，末次灌胃后對小鼠進行眼球取血，離心取血清備用，斷頸處死；

(2)糖尿病小鼠各項指標檢測：從實驗開始每天記錄小鼠攝食量、飲水量和體重，每兩周尾尖取血測血糖一次；

(3)臟器系數(shù)計算：末次灌胃結束后，眼球取血后處死，解剖分別取胸腺和脾臟，觀察臟器之間的粘連程度后，稱重計算胸腺與脾臟的臟器系數(shù)；

胸腺系數(shù)＝胸腺平均重量(mg)/小鼠平均體重(g)；

脾臟系數(shù)＝脾臟平均重量(mg)/小鼠平均體重(g)；

(4)血清一氧化氮合酶活力測定：按南京建成生物工程研究所的一氧化氮合酶(NOS)試劑盒(A014-2)說明書對小鼠的血清進行檢測操作，測定原理：NOS催化L-Arg和分子氧化反應生成NO，NO與親核性物質生成有色化合物，在530nm波長測定吸光度，根據(jù)吸光度的大小可計算出NOS活力；

(5)血清一氧化氮含量測定：按南京建成生物工程研究所的一氧化氮(NO)試劑盒(A012硝酸還原酶法)說明書對小鼠的血清進行檢測操作，NO化學性質活潑，體內代謝轉化為硝酸鹽(NO3-)和亞硝酸鹽(NO2-)，血清(NO3-)與(NO2-)濃度之和為(NO3-+NO2-)才能準確代表體內NO水平；

(6)血清超氧化物歧化酶活力測定：按南京建成生物工程研究所的超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒(A001-3：WST-1法)說明書對小鼠的血清進行檢測操作；

(7)血清丙二醛含量測定：按南京建成生物工程研究所的丙二醛試劑盒(A003-1)說明書對小鼠的血清進行檢測操作，測定意義：機體通過酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)產生氧自由基，后者能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸引發(fā)脂質過氧化作用，并由此形成脂質過氧化物，使組織細胞受損傷；

(8)統(tǒng)計學處理：用SPSS22.0軟件進行顯著性分析，結果用表示。