[發明專利]載有藥物的維生素B12

有效

• 申請號: 201610992427.3
• 申請日: 2016-11-11
• 公開（公告）號: CN106581645B
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發明（設計）人: 李弘劍;冉艷紅;劉天祥;陳美云;李萬維;楊曉蘋
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: A61K38/26
• 分類號: A61K38/26;A61K9/51;A61K47/18;A61K47/26;A61P3/10
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

1.一種載有藥物的維生素B₁₂衍生物自組裝納米微粒的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

(A)將藥物溶解于六氟異丙醇中，得到溶液A；將苯丙氨酸二肽溶解于六氟異丙醇中，得到溶液B；將如式I所示的可自主裝形成納米微粒的維生素B₁₂衍生物溶解于六氟異丙醇中，得到溶液C；

(B)將有機溶劑X或有機溶劑X溶液與溶液A混勻，得到溶液D；有機溶劑X為乙醇、丙酮或乙酸乙酯；

(C)將溶液B和溶液C混勻后加入到溶液D中，混勻，得到溶液E；

(D)將溶液E與水混勻，再加入PEG200，混勻，得到溶液F；冷凍干燥，加入水復溶重懸，得到載有藥物的維生素B₁₂衍生物自組裝納米微粒；

2.根據權利要求1所述載有藥物的維生素B₁₂衍生物自組裝納米微粒的制備方法，其特征在于：

所述的溶液A中的藥物的濃度為20mg/ml；

所述的溶液B中的苯丙氨酸二肽的濃度為100mg/ml；

所述的溶液C中可自主裝形成納米微粒的維生素B₁₂衍生物的濃度為1mg/ml；

所述的溶液D中，藥物的濃度為4mg/ml，有機溶劑X的濃度為體積百分比40％；

所述的有機溶劑X溶液的濃度為體積百分比50％；

所述的溶液E中，藥物的濃度為3.3mg/ml，有機溶劑X的濃度為體積百分比33％，苯丙氨酸二肽的濃度為13.3mg/ml，可自主裝形成納米微粒的維生素B₁₂衍生物的濃度為0.03mg/ml；

所述的溶液F中，藥物的濃度為0.1mg/ml，有機溶劑X的濃度為體積百分比10％，苯丙氨酸二肽的濃度為4mg/ml，可自主裝形成納米微粒的維生素B₁₂衍生物的濃度為0.01mg/ml，PEG200的終濃度為體積百分比1％。

3.根據權利要求1所述載有藥物的維生素B₁₂衍生物自組裝納米微粒的制備方法，其特征在于：所述的藥物為多肽類藥物和/或蛋白類藥物。

4.根據權利要求1所述載有藥物的維生素B₁₂衍生物自組裝納米微粒的制備方法，其特征在于：所述的可自主裝形成納米微粒的維生素B₁₂衍生物通過如下步驟制備得到：

(1)酰胺類中間產物的制備：

①將磷酸鎓鹽類耦合劑、DMF、DIEA和Boc-苯丙氨酸二肽混合，超聲水浴反應，得到酰胺類中間產物X₁；

②將DMF、碳二亞胺類耦合劑、HOAT和Boc-苯丙氨酸二肽混合，超聲水浴反應，得到酰胺類中間產物X₂；

(2)維生素B₁₂-OP的制備：

往步驟(1)①得到的酰胺類中間產物X₁或步驟(1)②得到的酰胺類中間產物X₂中加入維生素B₁₂-OD，超聲水浴反應，再加入乙酸乙酯終止反應，離心、棄上清、取沉淀、干燥，得到維生素B₁₂-OP；

其中，參與反應的各原料按如下摩爾比配比：

通過酰胺類中間產物X₁得到維生素B₁₂-羰基-腐胺時，維生素B₁₂-羰基-腐胺：磷酸鎓鹽類耦合劑：Boc-苯丙氨酸二肽：DIEA＝1：1～4：0.75～3：0.5～2；

通過酰胺類中間產物X₂得到維生素B₁₂-羰基-腐胺時，碳二亞胺類耦合劑：HOAT：Boc-苯丙氨酸二肽：維生素B₁₂-羰基-腐胺＝0.75～3：0.75～3：0.75～3：1；

還包括將步驟(2)得到的維生素B₁₂-OP經C18反相柱脫鹽以及將脫鹽產物通過半制備高效液相色譜進一步純化的步驟。