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[發明專利]一種調控丙酮丁醇梭菌胞外聚合物合成的方法有效

專利信息
申請號: 201610973505.5 申請日: 2016-11-04
公開(公告)號: CN106636168B 公開(公告)日: 2020-06-05
發明(設計)人: 應漢杰;許佳慧;柳東;王巖巖;沈曉寧;劉俊 申請(專利權)人: 南京工業大學
主分類號: C12N15/74 分類號: C12N15/74;C12N1/21;C12P7/26;C12P7/16;C12P1/04;C12P19/04;C12R1/145
代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237 代理人: 胡建華
地址: 210009 *** 國省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 調控 丙酮 丁醇 梭菌胞外 聚合物 合成 方法
【權利要求書】:

1.丙酮丁醇基因工程菌在EPS催化體系中的應用,其特征在于,所述的丙酮丁醇基因工程菌是利用二型內含子基因敲除技術在丙酮丁醇梭菌的Spo0A基因中插入內含子序列得到的;

所述的丙酮丁醇梭菌保藏編號為CGMCC No.5234;

所述的Spo0A基因為CA_C2071,其核苷酸序列如SEQ ID No.:1所示;

利用二型內含子基因敲除技術將SEQ ID No.:2所示的內含子序列插入Spo0A基因的第242bp和第243bp之間。

2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述二型內含子基因敲除技術的操作方法如下:

(1) 分析SEQ ID No:1所示的序列,得到內含子的核苷酸序列和基因的插入位點;

(2) 內含子序列構建到二型內含子基因敲除質粒中,得到重組質粒;

(3) 將步驟(2)得到的重組質粒轉化丙酮丁醇梭菌,篩選得到Spo0A基因失活的菌株。

3.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,所述的所述二型內含子基因敲除質粒為PMTL007C-E2質粒,該質粒的核苷酸序列如SEQ ID No:5所示。

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