[發明專利]一種同時測定復方丹參提取物或相關藥材中31種成分的方法

有效

• 申請號: 201610969524.0
• 申請日: 2016-10-27
• 公開（公告）號: CN107991399B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 佟玲;李云飛;李東翔;孫萬陽;蘆勤瑋
• 申請（專利權）人: 天士力醫藥集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/89
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為

本發明涉及一種同時測定復方丹參提取物或相關藥材中31種成分的方法，所述方法采用的是直接串聯?反相?親水作用色譜質譜聯用方法，所述方法包括如下步驟：步驟1樣品溶液的制備；步驟2標準系列溶液的制備；步驟3內標溶液的制備；步驟4供試品溶液的制備；步驟5取步驟4所得溶液注入直接串聯反相?親水作用液相色譜質譜聯用系統，得到31種分析物的提取離子流圖，根據提取離子流圖計算復方丹參提取物或相關藥材中31種成分的含量。

技術領域：

本發明涉及一種中藥有效成分的檢測方法，特別涉及一種同時測定復方丹參提取物或相關藥材中31種成分的方法。

背景技術：

質量平衡的研究對于闡明中藥化學物質組的組成具有重要意義。中藥化學物質組成極其復雜，含有眾多的初生代謝產物和次生代謝產物。

前期研究表明，復方丹參滴丸(由丹參、三七、冰片制成，具體制備方法見《中國藥典》2015年版)主要含有寡糖、氨基酸、核苷、有機酸、酚酸、皂苷和丹參酮類化合物。由于這些化合物的結構、物理化學性質差異大，研究者們通常多采用多種分析方法對不同類型的化合物進行定量分析，例如使用氨基酸分析儀檢測氨基酸，使用高效液相色譜-蒸發光散射檢測器檢測寡糖和皂苷，使用高效液相色譜-紫外檢測器或液相色譜質譜聯用儀對酚酸和丹參酮。多種分析方法的應用為質量平衡的研究帶來了極大不便。

反相色譜：流動相極性大于固定相極性的情況，稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。在現代液相色譜中應用最廣泛，現代液相色譜分析工作的70％以上是在非極性鍵合固定相上進行的。

親水作用色譜：可以被看作正相色譜向水性流動相領域的延續。流動相是水相緩沖液(＜40％)及有機溶劑。固定相是強親水性的極性吸附劑，如硅膠鍵合相，極性聚合物填料或離子交換吸附劑。這些固定相的共同特點是它們和水的作用力很強，因此屬于“親水性”。使用的梯度和反相模式相反。初始條件包括高比例有機相，典型的濃度是95％有機相如乙腈，逐步降低到水相。因此，又被稱為反反相色譜。

直接串聯-反相-親水作用色譜質譜聯用系統：將兩種分離模式的色譜柱直接串聯，使得從強極性到弱極性的物質均能得到較好的保留，從而達到分離的目的。

復方丹參提取物或相關藥材為現有藥物，由三七、丹參和冰片經過加工制備而成。具有活血化瘀，理氣止痛之功效。用于氣滯血瘀所致的胸痹，癥見胸悶、心前區刺痛；冠心病心絞痛見上述證候者。

本發明所述復方丹參提取物或相關藥材包括市售的復方丹參制劑，如復方丹參滴丸或復方丹參片，也包括三七和丹參的共同提取物或分別提取再混合的提取物，所述提取物市場上有售，如復方丹參浸膏、丹參浸膏、三七浸膏，也可參考現有技術中的制備方法制備得到，也包括三七和丹參藥材，如丹參粉末和三七粉末。

本發明所述復方丹參提取物或相關藥材，其中的31種有效成分分別為：腺嘌呤、琥珀酸、焦谷氨酸、腺苷、尿苷、丹參素、纈氨酸、賴氨酸、脯氨酸、原兒茶醛、葡萄糖、蔗糖、精氨酸、丹酚酸D、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、迷迭香酸、三糖、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A、人參皂苷Rb1、丹酚酸C、人參皂苷Rg2、人參皂苷Rh1、人參皂苷Rd、四糖、隱丹參酮、丹參酮I、丹參酮IIA。

針對現有質量平衡研究方法的不足，本研究建立了直接串聯-反相-親水作用色譜質譜聯用系統，可以對復方丹參提取物或相關藥材中的7大類、31種成分進行同時測定。

本發明建立了直接串聯-反相-親水作用色譜質譜聯用系統，對復方丹參提取物或相關藥材中性質差異極大的7大類、31種成分進行測定，可應用于復方丹參提取物或相關藥材的質量評價，具有全面、準確、快速的特點。

發明內容：

本發明提供了一種同時測定復方丹參提取物或相關藥材中31種成分的方法，該方法采用的是直接串聯-反相-親水作用色譜質譜聯用。

本發明提供的方法包括以下步驟：