[發(fā)明專利]激肽釋放酶7小分子抑制劑及其制備方法、用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610936016.2
• 申請日: 2016-11-01
• 公開（公告）號: CN106518868B
• 公開（公告）日: 2018-02-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王芳宇;譚瀟;王德平;嚴(yán)加林;何麗芳;周冬升;李玉林
• 申請（專利權(quán)）人: 衡陽師范學(xué)院
• 主分類號: C07D471/04
• 分類號: C07D471/04;A61K31/437;A61P17/00
• 代理公司: 北京風(fēng)雅頌專利代理有限公司11403
• 代理人: 李弘

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別是指一種激肽釋放酶7小分子抑制劑及其制備方法、用途。

背景技術(shù)

特應(yīng)性皮炎(AD)是一種廣泛傳播的慢性炎癥性皮膚病，特點(diǎn)是干燥、鱗狀皮膚、炎癥、皮膚滲透性增加，AD病人的皮膚對環(huán)境中常見的而對正常人無害的因素也會很敏感從而易于受到表面感染。在過去的30年間工業(yè)化國家的特應(yīng)性皮炎的發(fā)病率增長了2到3倍，據(jù)估計兒童的特應(yīng)性皮炎患病率達(dá)到了15-30％，成人的特應(yīng)性皮炎患病率達(dá)到了2-10％。由于發(fā)病機(jī)制的復(fù)雜性，對AD的發(fā)病機(jī)制了解得不多，但皮膚屏障功能紊亂已經(jīng)被證實(shí)是AD發(fā)展過程中的關(guān)鍵因素之一。

皮膚屏障的穩(wěn)定依賴于顆粒層的角質(zhì)形成細(xì)胞分化為角質(zhì)細(xì)胞和皮膚表層角質(zhì)細(xì)胞脫落(即脫屑)之間的平衡，皮膚的脫屑過程包括由(激肽釋放酶)KLKs參與的橋粒的降解，由于橋粒是角質(zhì)細(xì)胞的粘連蛋白，橋粒的降解則會導(dǎo)致角質(zhì)細(xì)胞脫落而致皮膚脫屑。證據(jù)顯示，局部或暫時性的KLKs活性控制的失調(diào)，是AD病人皮膚屏障穩(wěn)定缺失的主要原因之一。

KLKs(Kallikreins，激肽釋放酶)是具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶特異性的絲氨酸蛋白酶，其編碼基因定位于19q13.4，編碼15個分泌型絲氨酸蛋白酶KLK 1-KLK 15。已經(jīng)證明，KLKs存在于正常人的角質(zhì)層細(xì)胞中，目前發(fā)現(xiàn)，至少有8種KLK(KLK 5，KLK 6，KLK 7，KLK 8，KLK 10，KLK 11，KLK13和KLK 14)存在于人的角質(zhì)層和汗液中。

其中，KLK7占總量的40％。KLK7可能是皮膚損傷的一個關(guān)鍵酶，而且在AD病人中它可能參與一個系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)，在AD的角質(zhì)層KLK7升高最為突出，這提示KLK7在AD的發(fā)病機(jī)制上可能是至關(guān)重要的，因此，抑制KLK7的活性對于AD的治療顯得最為重要。

LEKTI(Lympho-epithelial Kazal-type-related inhibitor,淋巴上皮組織Kazal型相關(guān)蛋白抑制劑)是由SPINK5基因編碼的絲氨酸蛋白酶抑制劑家族的成員，LEKTI前體包含一個信號肽和彼此隔開的15個絲氨酸蛋白酶抑制域(D1-D15)，表達(dá)后迅速被弗林蛋白酶水解為幾個蛋白片段，其中包含D6-D9抑制域的LEKTI能抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、KLK5和KLK7等酶的活性。LEKTI的內(nèi)源靶至少包括KLK5、KLK7和KLK14，它們共同參與皮膚的脫屑過程。在AD病人，LEKTI表達(dá)水平嚴(yán)重降低，導(dǎo)致了KLK7活性的異常升高。

盡管LEKTI是表皮內(nèi)KLK7的天然抑制劑，但作為治療AD的外用藥，其不能透過皮膚角質(zhì)層，同時由于其大分子蛋白質(zhì)的特性也會導(dǎo)致其降解速度過快，因而將LEKTI作為外用藥作用非常有限。并且，到目前為止，還沒有一種有效的KLK7小分子抑制劑應(yīng)用于臨床。因此，如果能得到作為皮膚外用藥的KLK7的小分子抑制劑，將有助于AD的治療。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提出一種激肽釋放酶7小分子抑制劑及其制備方法、用途，其作為小分子抑制劑能有效抑制KLK7，具有應(yīng)用于制備特應(yīng)性皮炎的治療藥物的前景。

本發(fā)明通過以KLK7作為靶分子，根據(jù)KLK7的晶體結(jié)構(gòu)，以及藥效團(tuán)模型進(jìn)行分析與篩選，合成出具有KLK7抑制作用的小分子化合物，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，該化合物具有顯著的抑制KLK7作用。

基于上述目的本發(fā)明提供的激肽釋放酶7小分子抑制劑的化合物結(jié)構(gòu)由式(I)表示：

基于相同的發(fā)明構(gòu)思，本發(fā)明還提供了激肽釋放酶7小分子抑制劑的制備方法，包括以下步驟：

步驟1)化合物(Ⅱ)溶解于70％-98％(質(zhì)量分?jǐn)?shù))H₂SO₄中，滴加70％-98％(質(zhì)量分?jǐn)?shù))H₂SO₄與50％-98％(質(zhì)量分?jǐn)?shù))HNO₃形成的混酸，控溫30℃以下，反應(yīng)4-6小時，得化合物(Ⅲ)，倒入冰水中，過濾得化合物(Ⅲ)粗品，過柱分離得化合物(Ⅲ)；

步驟2)向反應(yīng)瓶中加入水，鐵粉，5％-37％(質(zhì)量分?jǐn)?shù))鹽酸，控溫80-100℃，分批加入化合物(Ⅲ)，反應(yīng)2-3小時，以碳酸鈉中和，過柱分離得化合物(Ⅳ)；

步驟3)向反應(yīng)瓶中加入化合物(Ⅳ)、乙醚、三乙胺，再滴加丁二酰氯，室溫反應(yīng)1-3小時，過柱分離得化合物(Ⅴ)；