[發明專利]一種脫落細胞一步染色法、所用染料組合及試劑盒在審
| 申請號： | 201610929313.4 | 申請日： | 2016-10-31 |
| 公開（公告）號： | CN108007754A | 公開（公告）日： | 2018-05-08 |
| 發明（設計）人： | 陳石磊;趙路;趙志煒 | 申請（專利權）人： | 陳石磊 |
| 主分類號： | G01N1/30 | 分類號： | G01N1/30 |
| 代理公司： | 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 李艷;許亦琳 |
| 地址： | 201203 上海市*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 脫落 細胞 一步 染色 所用 染料 組合 試劑盒 | ||
1.一種脫落細胞一步染色法，所述一步染色指對脫落細胞的細胞核及細胞漿進行同步染色，包括采用熒光染料組合對脫落細胞進行一步染色，所述熒光染料組合含有細胞核熒光染料和細胞漿熒光染料。
2.根據權利要求1所述的脫落細胞一步染色法，細胞核熒光染料對細胞核染色后發出的熒光波長與細胞漿熒光染料對細胞漿染色后發出的熒光波長不同，能夠區別。
3.根據權利要求1所述的脫落細胞一步染色法，其特征在于，所述細胞核熒光染料選自：DAPI、Syto DNA、Hoechst 33342、Hoechest33258、PI、EB；所述細胞漿熒光染料選自：AO、FITC、CPO、鬼筆環肽。
4.根據權利要求1所述的脫落細胞一步染色法，其特征在于，所述熒光染料組合由DAPI及AO組成。
5.根據權利要求4所述的脫落細胞一步染色法，其特征在于，采用由DAPI及AO組成的熒光染料組合對脫落細胞進行一步染色時，DAPI與細胞混合時的工作濃度范圍是：0.025～0.50ug/ml；AO與細胞混合時工作濃度范圍是1.0～10ug/mL。
6.根據權利要求4所述的脫落細胞一步染色法，其特征在于，采用由DAPI及AO組成的熒光染料組合對脫落細胞進行一步染色時，DAPI和AO溶解于同一熒光保存液中。
7.根據權利要求5所述的脫落細胞一步染色法，其特征在于，所述熒光保存液的pH值范圍是2.0～6.0。
8.根據權利要求5所述的脫落細胞一步染色法，其特征在于，所述熒光保存液選自：磷酸緩沖液、HEPES緩沖液、醋酸緩沖液或檸檬酸緩沖液。
9.根據權利要求1所述的脫落細胞一步染色法，其特征在于，采用熒光染料組合對脫落細胞進行一步染色后，無需沖洗。
10.根據權利要求1所述的脫落細胞一步染色法，其特征在于，所述一步染色法僅需5min即可完成染色。
11.一種脫落細胞一步染色法用熒光染料組合，其特征在于，所述熒光染料組合含有細胞核熒光染料和細胞漿熒光染料。
12.根據權利要求11所述的熒光染料組合，其特征在于，細胞核熒光染料對細胞核染色后發出的熒光波長與細胞漿熒光染料對細胞漿染色后發出的熒光波長不同，能夠區分。
13.根據權利要求11所述的熒光染料組合，其特征在于，所述細胞核熒光染料選自：DAPI、Syto DNA、Hoechst 33342、Hoechest33258、PI、EB；所述細胞漿熒光染料選自：AO、FITC、CPO、鬼筆環肽。
14.根據權利要求11所述的熒光染料組合，其特征在于，所述熒光染料組合由DAPI及AO組成。
15.一種脫落細胞一步染色法用染液，其特征在于，所述染液包括如權利要求11～14任一項所述脫落細胞一步染色法用熒光染料組合和熒光保存液。
16.根據權利要求15所述的脫落細胞一步染色法用染液，其特征在于，所述熒光保存液的pH值范圍是2～8。
17.根據權利要求15所述的脫落細胞一步染色法用染液，其特征在于，所述熒光保存液選自：磷酸緩沖液、HEPES緩沖液、醋酸緩沖液或檸檬酸緩沖液。
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