[發明專利]一種高效檢測水產品中頭孢菌素殘留量的方法

有效

• 申請號: 201610920267.1
• 申請日: 2016-10-21
• 公開（公告）號: CN107037140B
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發明（設計）人: 梅光明;丁國芳;張小軍;孟春英
• 申請（專利權）人: 浙江省海洋水產研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

1.一種高效檢測水產品中頭孢菌素殘留量的方法，其特征在于，所述方法包括：樣品經提取溶劑提取、多壁碳納米管固相萃取凈化后，采用超高效液相色譜C₁₈柱分離，三重四級桿質譜儀在多反應監測模式下測定，采用基質匹配法制作標準曲線進行外標法定量；

所述提取溶劑為乙腈、乙腈-水溶液或甲醇-偏磷酸水溶液；

所述頭孢菌素為頭孢哌酮、頭孢喹肟、頭孢洛寧、頭孢唑啉、頭孢匹林、頭孢噻呋、頭孢匹羅與頭孢氨芐；

所述超高效液相色譜C₁₈柱為Acquity Xselect CSH C₁₈柱2.1 ×50 mm，1.7 μm；柱溫40℃；

所述超高效液相色譜的色譜條件為：進樣量10 μL；流速：0.3 mL/min；流動相A為0.05-0.2%甲酸水溶液，B為乙腈，梯度洗脫：0→3.0 min，90%→60% A; 3.0→4.0 min，60%→40%A; 4.0→5.0 min，40%→90% A; 5.0→6.5 min，90% A；

所述三重四級桿質譜儀的質譜條件為：電噴霧離子源，正離子模式；毛細管電壓3.50kv；離子源溫度120℃；脫溶劑氣溫度380℃；脫溶劑氣流量600 L/h；錐孔氣流量50 L/h；多反應監測掃描模式；

所述樣品的處理方法為：稱取5.0g樣品于50mL離心管中，加入20mL體積比為4:1的乙腈-水溶液，渦旋振蕩提取2min，5000r/min離心6 min，上清液轉移至100 mL雞心瓶中，殘渣中再加入15mL乙腈-水溶液重復提取操作一次，合并兩次提取液，加入4 mL飽和氯化鈉溶液后于40℃旋轉蒸發除去乙腈，向雞心瓶中加入10 mL的0.10 mol/L磷酸鹽緩沖溶液，渦旋混勻1 min使分析物充分溶解，全部上樣過MWCNTs 小柱，再分別用6 mL磷酸鹽緩沖溶液、6 mL水淋洗，最后用6 ml乙腈洗脫并接收洗脫液于45 ℃氮氣吹干，用2 mL純水充分溶解，過0.22μm水相濾膜后供UPLC-MS/MS儀測定。

2.根據權利要求1所述的一種高效檢測水產品中頭孢菌素殘留量的方法，其特征在于，多壁碳納米管固相萃取柱的制備方法為：稱取2g多壁碳納米管粉末于500 mL單口燒瓶中，加入50 mL濃硫酸和100 mL濃硝酸，超聲振蕩1h，靜置后除去上層液，固體物反復用純水洗至中性，80℃干燥后研磨成細粉末；裝柱前，分別用純水、甲醇清洗6mL的聚丙烯SPE柱空管和20 μm聚乙烯柱篩板，待小柱和篩板干燥后，先用篩板封住SPE柱底部，再稱取45-80mg多壁碳納米管于小柱中，墊上柱篩板壓實，通過調節上篩板向下壓緊程度來控制多壁碳納米管填料厚度在0.6 cm；填裝好的多壁碳納米管SPE柱裝于密封袋中，使用前使用前用5 mL甲醇、5 mL水和5 mL磷酸鹽緩沖液活化。

3.根據權利要求1所述的一種高效檢測水產品中頭孢菌素殘留量的方法，其特征在于，所述提取溶劑為乙腈-水溶液。

4.根據權利要求2所述的一種高效檢測水產品中頭孢菌素殘留量的方法，其特征在于，多壁納米碳管在放入單口燒瓶前，將多壁碳納米管與濃度為65-75wt%的乳酸溶液混合均勻后加熱攪拌，其中所述多壁碳納米管與乳酸溶液的質量比為100:4-6，加熱溫度為80-95℃，加熱時間40-60min；在加熱攪拌過程中向反應液逐漸加入質量為所述多壁碳納米管20-25%的濃度為30wt%的雙氧水溶液；在加熱攪拌結束后調節pH至中性，最后真空干燥。