[發明專利]細菌基因編輯方法有效
| 申請號： | 201610919263.1 | 申請日： | 2016-10-21 |
| 公開（公告）號： | CN106609279B | 公開（公告）日： | 2020-08-14 |
| 發明（設計）人： | 胡育誠;鍾沐恩;葉懿心;李泓 | 申請（專利權）人： | 胡育誠;長春人造樹脂廠股份有限公司;長春石油化學股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/70 | 分類號： | C12N15/70;C12N15/74 |
| 代理公司： | 隆天知識產權代理有限公司 72003 | 代理人： | 王芝艷;吳小瑛 |
| 地址： | 中國臺*** | 國省代碼： | 臺灣;71 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 細菌 基因 編輯 方法 | ||
1.一種細菌基因編輯方法，其特征在于，所述細菌基因編輯方法包括步驟：
提供一菌體，其中所述菌體為藍綠菌；
將一pHR_trc模板質粒和一pCas9-NSI質粒共同送入所述菌體中，以得到一培養菌液，其中所述pHR_trc模板質粒是將一pSYN_1質粒中的一sc啟動子替換為一誘導型trc啟動子所獲得的，所述pCas9-NSI質粒是由一pCas9質粒嵌入一5’-gcctgaaagcgtgacgagca-3’序列所獲得的；以及
將所述培養菌液涂布在一培養基上進行培養。
2.如權利要求1所述的細菌基因編輯方法，其特征在于，所述藍綠菌為細長聚球藻的S.elongatus PCC 7942菌株。
3.如權利要求1所述的細菌基因編輯方法，其特征在于，所述pHR_trc模板質粒用以作為一同源互換的模板。
4.如權利要求1所述的細菌基因編輯方法，其特征在于，所述pHR_trc模板質粒上含有：一抵抗抗生素觀霉素的基因SpecR、一熒光蛋白EGFP、以及同源互換區域NSIa和NSIb。
5.如權利要求1所述的細菌基因編輯方法，其特征在于，所述pCas9-NSI質粒用以正確地結合到一預定位置并進行基因重組作用。
6.如權利要求1所述的細菌基因編輯方法，其特征在于，所述預定位置為一雙股斷裂位置。
7.如權利要求1所述的細菌基因編輯方法，其特征在于，將所述pHR_trc模板質粒和所述pCas9-NSI質粒送入所述菌體的方法為細菌自然吞噬法。
8.如權利要求4所述的細菌基因編輯方法，其特征在于，所述培養基為含有觀霉素的BG-11培養基。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于胡育誠;長春人造樹脂廠股份有限公司;長春石油化學股份有限公司，未經胡育誠;長春人造樹脂廠股份有限公司;長春石油化學股份有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201610919263.1/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
