[發明專利]用于調節鐵穩態的組合物及其使用方法

在審

• 申請號: 201610908297.0
• 申請日: 2012-01-19
• 公開（公告）號: CN107022032A
• 公開（公告）日: 2017-08-08
• 發明（設計）人: 赫伯特·Y·林;朱迪·L·巴比特;特蕾西·曼哈爾;帕特里克·吉爾林
• 申請（專利權）人: 菲盧馬克斯制藥公司;通用醫療公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N5/10;A61K38/17;A61P3/12;A61P35/00
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司11270
• 代理人: 康艷青,姚開麗

本申請是申請日為2012年1月19日、申請人為菲盧馬克斯制藥公司、通用醫療公司，發明名稱為“用于調節鐵穩態的組合物及其使用方法”的中國專利申請201280013021.6的分案申請。

相關申請

本申請要求2011年1月19日提交的美國臨時專利申請號61/434,405的優先權，該臨時專利申請的全文通過引用納入本文。

技術領域

本公開總體涉及鐵穩態紊亂的治療、預防和改善，尤其與貧血的管理相關。本公開更具體地涉及血幼素(hemojuvelin)-免疫球蛋白Fc結構域融合蛋白及由其衍生的變體、衍生物和肽模擬物以及利用這些組合物改變人體內的血清鐵、血清血紅蛋白和/或血細胞比容水平的方法。

背景技術

鐵是幾乎每種有機體的生長和生存所需要的必需元素。紅血球(RBC)含有血紅蛋白(Hb)，一種紅色的、富含鐵的蛋白，其從肺部攜帶氧氣至身體的所有肌肉和器官，在這些肌肉和器官中血紅蛋白反應以提供身體正常活動所需的能量。當紅血球數目或它們含有的血紅蛋白數量降至低于正常水平時，身體接收到比其發揮正常功能所需更少的氧氣、產生更少的能量。這種情況通常稱為貧血。嬰兒和兒童貧血的常見原因是鐵缺乏。美國多達20％的兒童以及發展中國家中80％的兒童在18歲以前的某個時間會患有貧血。Martin,P.L.等，The Anemias,Principles and Practices of Pediatrics(兒科貧血、原理與實踐),1657(Lippincott 1994，第二版)。

哺乳動物中，鐵平衡主要在十二指腸吸收膳食中的鐵這個水平調節。在人類中，遺傳性血色素沉著病(HH)是由膳食鐵過量吸收引起的一種常見的常染色體隱性遺傳疾病，導致血漿和多個器官(尤其包括胰腺、肝臟、和皮膚)中鐵超負荷，并由于鐵沉積而引起這些器官和組織的損傷。

青少年血色素沉著病是一種由編碼主要的鐵調節激素鐵調素(HAMP)和血幼素(HFE2)的基因突變而引起的鐵超負荷紊亂(Roetto,A.,等.2003.Nut.Genet.33:21-22；Papanikolaou,G.,等2004.Nut.Genet.36:77-82.)。已證明血幼素是骨形態發生蛋白(BMP)的輔助受體，血幼素介導的BMP信號調節鐵調素表達和鐵代謝(Babitt,J.L.,等2006.Nat.Genet.38:531-539；Babitt,J.L.,等.2007.J Clin Invest.117:1933-1939.)。然而，鐵調素在體內的內源BMP調節子是未知的。

血幼素(也稱為RGMc)是排斥導向分子(Repulsive Guidance Molecules)蛋白家族的成員，該家族包括RGMa和DRAGON(RGMb)，它們有50-60％的氨基酸同一性(Samad,T.A.,等2004.J.Neurosci.24:2027-2036.)。

需要一種成本有效的、高效的方法來調節鐵調素表達和鐵代謝。

發明內容

本公開提供血幼素(“HJV”)-免疫球蛋白Fc結構域融合蛋白。本公開還提供利用這些蛋白治療鐵穩態紊亂的方法。HJV可以是哺乳動物HJV。更具體地，HJV可以是小鼠或人HJV。

本公開還提供組合物，該組合物含有與SEQ ID NO:9的序列95％相同的融合蛋白或由其衍生的變體、衍生物或肽模擬物。一種實施方式中，所述融合蛋白或由其衍生的變體、衍生物或肽模擬物的經尺寸排阻色譜確定的純度至少為98％。另一種實施方式中，所述融合蛋白或由其衍生的變體、衍生物或肽模擬物是糖基化的。某些實施方式中，SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.9的天冬酰胺83、天冬酰胺178和天冬酰胺337是N-糖基化位點。在該實施方式的一個方面，糖基化模式是哺乳動物糖基化模式。具體而言，糖基化模式來自中國倉鼠卵巢(CHO)細胞系。

另一種實施方式中，所述融合蛋白或由其衍生的變體、衍生物或肽模擬物的N-末端氨基酸是谷氨酰胺。在該實施方式的一個方面，所述融合蛋白或由其衍生的變體、衍生物或肽模擬物的N-末端是QCKILRCNAE(SEQ ID NO:10)。另一種實施方式中，N-末端片段可以是來自SEQ ID NO:1或9的頭150個氨基酸的任何片段。