[發(fā)明專利]參芪降糖制劑含量測(cè)定方法及其在整體質(zhì)量控制中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610890089.2
• 申請(qǐng)日: 2016-10-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106526002B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張慧;張曉靜;顏繼忠;姜慧潔
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

本發(fā)明提供了一種參芪降糖制劑含量測(cè)定方法，所述方法測(cè)定的是參芪降糖制劑中10個(gè)活性成分的含量：人參皂苷Rb1、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、黃芪甲苷、五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子醇乙；本發(fā)明以化合物降糖活性為導(dǎo)向檢測(cè)復(fù)方中的多種活性物質(zhì)，能夠更好的反應(yīng)整個(gè)復(fù)方制劑的質(zhì)量水平；同時(shí)，選取Q?MS離子監(jiān)測(cè)模式進(jìn)行含量測(cè)定，質(zhì)譜定量準(zhǔn)確性高、專屬性強(qiáng)、靈敏度高，優(yōu)于傳統(tǒng)HPLC分析方法；根據(jù)本發(fā)明方法得到的不同批次參芪降糖制劑液相圖構(gòu)建了指紋圖譜，進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，更科學(xué)全面的評(píng)價(jià)參芪降糖制劑產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量，為建立更高水平的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物質(zhì)量控制領(lǐng)域，具體涉及高效液相色譜-單四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC-Q-MS)對(duì)參芪降糖制劑多成分含量測(cè)定的方法，以及對(duì)由此法得到的參芪降糖制劑液相圖構(gòu)建指紋圖譜，還涉及此法在在參芪降糖制劑整體質(zhì)量控制中的應(yīng)用。

(二)背景技術(shù)

糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)屬于中醫(yī)“消渴病”范疇：“渴而飲水多，小便數(shù)，無(wú)脂似麩片甜者，皆是消渴病也”。國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(IDF)指出，目前全球有4.15億糖尿病成年患者，3.18億人存在患糖尿病風(fēng)險(xiǎn)，其中，II型糖尿病占全球所有糖尿病病例的90％，因糖尿病伴發(fā)的高血糖，易導(dǎo)致各種組織，特別是眼、腎、心臟、血管、神經(jīng)的慢性損害、功能障礙等并發(fā)癥，大大降低了糖尿病患者的生活質(zhì)量。

目前，臨床上糖尿病的治療除注射胰島素外主要口服磺脲類和雙胍類降糖藥物，但西藥在有效降低血糖的同時(shí)也存在眾多的安全性問(wèn)題和不良反應(yīng)，如嚴(yán)重的低血糖、乳酸性酸中毒、胃腸道反應(yīng)及肝損傷、永久性神經(jīng)功能損傷、頭痛、頭暈甚至死亡等。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，中藥的降血糖作用溫和持久，療效穩(wěn)定，副作用小，恰好彌補(bǔ)了化藥的不足，日益受到國(guó)內(nèi)外內(nèi)分泌界的高度重視。

參芪降糖顆粒(Shenqi Jiangtang Granule，SJG)，由11味傳統(tǒng)中藥材組成，純中藥復(fù)方制劑，屬于國(guó)家四類新藥，也是國(guó)家二級(jí)中藥保護(hù)品種，在臨床上主要適用于II型糖尿病氣陰兩虛證患者，臨床數(shù)據(jù)顯示效果良好。方中人參為扶陽(yáng)益陰之良品，黃芪為補(bǔ)氣升陽(yáng)之要藥，兩者共為君藥；臣以生地、麥冬、天花粉生津潤(rùn)燥而止渴；佐以枸杞子、五味子、覆盆子封固腎關(guān)；使以山藥、茯苓、澤瀉三焦并理。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道：人參中人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1均有降糖活性，2015版中國(guó)藥典規(guī)定人參莖葉總皂苷的質(zhì)量控制指標(biāo)成分是人參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1；黃芪中黃芪甲苷、刺芒柄花素、毛蕊異黃酮均有降糖活性，2015版中國(guó)藥典規(guī)定黃芪藥材的質(zhì)量控制指標(biāo)成分是黃芪甲苷；現(xiàn)代藥理學(xué)研究亦證明生地中的低聚糖、梓醇、地黃苷D均有降糖效果；五味子醇甲是中國(guó)藥典中規(guī)定的檢測(cè)五味子藥材的指標(biāo)性成分；麥冬、天花粉、枸杞子、山藥、茯苓發(fā)揮降糖效果的主要是多糖類物質(zhì)或凝集素類化合物。

美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)提倡，糖尿病治療的目標(biāo)是把血糖降至正常水平或接近正常水平，同時(shí)減少并發(fā)癥的發(fā)生，參芪降糖顆粒多成分、多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)更適于糖尿病的治療。查閱國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，目前，已報(bào)道的對(duì)參芪降糖顆粒的質(zhì)量控制主要是：通過(guò)薄層鑒別了人參皂苷和黃芪皂苷，并用5％香草醛-冰乙酸法測(cè)定人參總皂苷和黃芪總皂苷的含量；利用HPLC法測(cè)定了參芪降糖顆粒中人參皂苷Re和Rg1的含量。以上方法大多只是對(duì)參芪降糖制劑中的一種或兩種成分進(jìn)行定性定量分析，不能反映整個(gè)復(fù)方制劑的質(zhì)量水平，且各有不足，比如：選擇性差、靈敏度低、試劑污染環(huán)境等。HPLC-Q-MS聯(lián)用已成為復(fù)雜體系分離分析以及化合物結(jié)構(gòu)鑒定的良好平臺(tái)，但迄今未見(jiàn)使用此技術(shù)對(duì)參芪降糖制劑中的多類活性成分同時(shí)進(jìn)行分析的文獻(xiàn)報(bào)道，更重要的是，HPLC-Q-MS的高靈敏度、高選擇性和高分辨率能夠彌補(bǔ)傳統(tǒng)HPLC的不足，并可以對(duì)復(fù)雜的中藥復(fù)方制劑的多類成分進(jìn)行同時(shí)測(cè)定。

(三)發(fā)明內(nèi)容