[發明專利]一種朝鮮薊品種LORCA（勞卡）二步生根方法

有效

• 申請號: 201610885043.1
• 申請日: 2016-10-11
• 公開（公告）號: CN106258987B
• 公開（公告）日: 2018-03-16
• 發明（設計）人: 王中美;張平喜;王楨;李樹舉;吳亞飛;周娟;夏繼國;陳祖宏;尤龍威
• 申請（專利權）人: 愛可道生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海諾衣知識產權代理事務所(普通合伙)31298
• 代理人: 劉紅祥

技術領域

本發明涉及植物組培技術領域，具體涉及一種朝鮮薊品種LORCA（勞卡）二步生根方法。

背景技術

LORCA是常德市2005年從法國引進的一個朝鮮薊加工型品種，該品種花苞卵球形（介于圓球形和橄欖形之間），苞片青綠色，花苞緊實、鮮嫩，可食率高，結蕾性較強，品質較好，適于加工成罐頭。全生育期240天左右，采收期60天。2014年在湖南省登記認定，現已成為當地的主栽品種。跟其他朝鮮薊品種一樣，LORCA在我國也只開花不結果，無法自留種，每年都需要從國外購買。朝鮮薊種子昂貴，平均每顆0.4-0.5元，而且經常延誤農時。因此，對朝鮮薊進行組織培養是解決朝鮮薊種苗繁育的一個非常重要方式。

2008年，國內開始研究朝鮮薊組織培養，但未能獲得成功。2011年，常德市農業科學研究所報道朝鮮薊組培成功，采用的品種為洋薊一號。但朝鮮薊內源激素較多，各品種之間差別較大。我們也采用了該朝鮮薊組培方法，但生根率不理想，僅為20%，而且玻璃化非常嚴重，無法實現朝鮮薊組培工廠化育苗體系。

所有的資料都報道朝鮮薊是一種蓮座型植物，生根較難。而且，即使生根，根系質量不過關，大多都為單獨一根，又容易碰斷，影響移栽成活率，造成組培成本高。

發明內容

本發明目的在于提供一種朝鮮薊品種LORCA（勞卡）二步生根方法，其目的在于解決現有朝鮮薊組培方法中玻璃化的問題，并且提高生根率，培育壯苗，以提高瓶苗成活率。

本發明的目的通過以下技術方案實現：

一種朝鮮薊品種LORCA（勞卡）二步生根方法，包括如下步驟：

（1） 生根培養基配制

（1.1）母液配制及保存

選用化學純或分析純的化學藥品，根據MS培養基配方，大量元素配成20倍，其中C_aCl₂單獨配成40

倍；微量元素配成100倍；鐵鹽配成100倍；有機物配成100倍，其中肌醇單獨配成100倍；L-酪氨酸配成20倍，NAA配成0.1mg·mL^-1，6-BA配成0.1mg·mL^-1,將所有母液保存在4℃的冰箱里；

（1.2）培養基配制

第一步生根培養基：1/2MS+NAA1.0mg·L^-1+6-BA0.6mg·L^-1+ L-酪氨酸50mg·L^-1+活性炭2.0g·L^-1+肌醇50mg·L^-1，瓊脂粉7 g·L^-1，白糖20 g·L^-1，pH 5.5；

第二步生根培養基：MS+肌醇50mg·L^-1，瓊脂7 g·L^-1，白糖40 g·L^-1，pH 5.5；

瓊脂粉采用凝膠強度>1300g/cm²的瓊脂粉，一般每升用量5克左右；

培養基采用240ml玻璃培養瓶分裝，不使用普通的透氣瓶蓋，采用14×14cm的白色牛皮紙，再使用

白色棉繩扎緊瓶口；

（1.3）培養基滅菌

瓶裝培養基在10h內完成滅菌，滅菌方式采用高壓蒸汽滅菌，在壓力0.105MPa、溫度121℃條件下滅

菌20min～30min；鍋內的滅菌物以不超過鍋的容量3/4，高壓滅菌時鍋內使用蒸餾水；

（1.4）培養基保存

滅菌后的培養基放入接種室，常溫條件下7d內使用，2℃～4℃條件下14d內使用；培養基應保存于

潔凈環境中，注意避光和防塵；

（2）組培苗培養條件

培養室的溫度控制在25℃±3℃，相對空氣濕度控制在70%～80%，光照強度為27μmol?m-2?s-1～

36μmol?m^-2?s^-1，光照時間為12h/d；

（3）生根培養

（3.1） 第一步生根培養

將誘導出的朝鮮薊叢生芽，高1.5厘米以上的芽切割下來，移入第一步生根培養基中；移栽完畢后，放入組培培養架上，關掉培養架上的燈，并用報紙將瓶苗蓋上，遮光2天；

（3.2）第二生根培養

15-20天后，有一小部分瓶苗長出白色的根；如果根系不是很長的話，一律接種到第二步生根培養基中；若根系太長或者太多，就留下來直接馴化；

（4） 煉苗

（4.1）煉苗標準