[發明專利]一種朝鮮薊品種LORCA（勞卡）二步生根方法

有效

• 申請號: 201610885043.1
• 申請日: 2016-10-11
• 公開（公告）號: CN106258987B
• 公開（公告）日: 2018-03-16
• 發明（設計）人: 王中美;張平喜;王楨;李樹舉;吳亞飛;周娟;夏繼國;陳祖宏;尤龍威
• 申請（專利權）人: 愛可道生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海諾衣知識產權代理事務所(普通合伙)31298
• 代理人: 劉紅祥

1.一種朝鮮薊品種LORCA（勞卡）二步生根方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1） 生根培養基配制

（1.1）母液配制及保存

選用化學純或分析純的化學藥品，根據MS培養基配方，大量元素配成20倍，其中C_aCl₂單獨配成40倍；微量元素配成100倍；鐵鹽配成100倍；有機物配成100倍，其中肌醇單獨配成100倍；L-酪氨酸配成20倍，NAA配成0.1mg·mL^-1，6-BA配成0.1mg·mL^-1將所有母液保存在4℃的冰箱里；

（1.2）培養基配制

第一步生根培養基：1/2MS+NAA1.0mg·L^-1+6-BA0.6mg·L^-1+ L-酪氨酸50mg·L^-1+活性炭2.0g·L^-1+肌醇50mg·L^-1，瓊脂粉7 g·L^-1，白糖20 g·L^-1，pH 5.5；

第二步生根培養基：MS+肌醇50mg·L^-1，瓊脂7 g·L^-1，白糖40 g·L^-1，pH 5.5；

瓊脂粉采用凝膠強度>1300g/cm²的瓊脂粉，每升用量5克；

培養基采用240ml玻璃培養瓶分裝，不使用普通的透氣瓶蓋，采用14×14cm的白色牛皮紙，再使用白色棉繩扎緊瓶口；

（1.3） 培養基滅菌

瓶裝培養基在10h內完成滅菌，滅菌方式采用高壓蒸汽滅菌，在壓力0.105MPa、溫度121℃條件下滅菌20min～30min；鍋內的滅菌物不超過鍋的容量3/4，高壓滅菌時鍋內使用蒸餾水；

（1.4） 培養基保存

滅菌后的培養基放入接種室，常溫條件下7d內使用，2℃～4℃條件下14d內使用；培養基應保存于潔凈環境中，注意避光和防塵；

（2） 組培苗培養條件

培養室的溫度控制在25℃±3℃，相對空氣濕度控制在70%～80%，光照強度為27μmol?m-2?s-1～36μmol?m^-2?s^-1，光照時間為12h/d；

（3）生根培養

（3.1） 第一步生根培養

將誘導出的朝鮮薊叢生芽，高1.5厘米以上的芽切割下來，移入第一步生根培養基中；移栽完畢后，放入組培培養架上，關掉培養架上的燈，并用報紙將瓶苗蓋上，遮光2天；

（3.2）第二生根培養

15-20天后，有一小部分瓶苗長出白色的根；如果根系長度不到0.5㎝，一律接種到第二步生根培養基中；若根系長度在0.5㎝以上或者根系的數量在3條以上，就留下來直接馴化；

（4） 煉苗

（4.1） 煉苗標準

當幼苗發育到2～3 片葉、3～5 條根，葉片1～2 cm 長、根長0.5～1cm時，即可進行煉苗處理；

（4.2） 組培苗馴化

將裝組培苗的培養瓶從培養架上取下，迅速轉移到日光溫室中，自然散射光下煉苗，溫度控制在20℃～25℃，每天中午在培養瓶周圍噴灑霧水，以保濕降溫，封口煉苗1d～2d；

（4.3） 開瓶鍛煉

封口煉苗后打開瓶口，向瓶內注入超過培養基表面0.5cm高的自來水，溫度控制在20℃～25℃，2d～3d后即可移栽；

（5） 移栽

（5.1）基質準備

栽培基質采用草炭土和珍珠巖，按5:2比例配制；新基質不需要消毒，使用過的基質用使用2000倍高錳酸鉀溶液浸泡12h，使用128孔穴盤種植幼苗；

（5.2） 移栽種植

移栽前，用自來水把根系上的培養基沖洗干凈，用1000倍甲基托布津或多菌靈浸泡組培苗根部，放置于通風陰涼處晾干水分至根系發白變軟，再栽入已準備好的基質中；栽后將基質澆透水，隨即拱膜保濕，7～l0天后揭膜通風煉苗；

（5.3） 病蟲害管理

苗期病害為立枯病，防治方法：育苗前使用0.05%炭疽福美作藥土防治，或50%多菌靈、70%甲基硫菌靈作藥土防治，每平方米用藥8～9克；幼苗發病前期噴藥防治，選用70%土菌消（惡霉靈）可濕性粉1000倍液，或70%甲基硫菌靈可濕性粉劑800倍液，隔周噴施，共噴兩次；

蟲害主要是螞蟻，防治方法：在育苗床周邊撒一圈百蟲靈作為驅蟻藥；

（5.4） 大田移栽標準

當苗高8～10cm，葉片3～4時，帶基質移栽到大田。