[發明專利]新生化顆粒的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201610878776.2
• 申請日: 2016-09-30
• 公開（公告）號: CN106645450B
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發明（設計）人: 唐于平;孫大正;黃盛良;段金廒
• 申請（專利權）人: 南京中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 楊海軍

1.一種新生化顆粒的質量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)對照品溶液的制備

分別精密稱定適量的對照品，用甲醇溶解配制成以下對照品溶液：1號樣品：葫蘆巴堿，2號樣品：鹽酸水蘇堿，3號樣品：尿嘧啶，4號樣品：原兒茶酸，5號樣品：羥基紅花黃色素A，6號樣品：綠原酸，7號樣品：苦杏仁苷，8號樣品：咖啡酸，9號樣品：鹽酸益母草堿，10號樣品：蘆丁，11號樣品：對香豆酸，12號樣品：甘草苷，13號樣品：阿魏酸，14號樣品：山奈酚-3-O-β-D-蕓香糖苷，15號樣品：姜酮，16號樣品：異甘草苷，17號樣品：洋川芎內酯I，18號樣品：洋川芎內酯H,19號樣品：甘草素，20號樣品：槲皮素，21號樣品：山奈酚，22號樣品：甘草酸，23號樣品：6-姜辣素，24號樣品：洋川芎內酯A，25號樣品：藁本內酯，26號樣品：正丁烯基苯酞和27號樣品：6-姜烯酚的混合對照品貯備液，低溫條件下貯藏對照品貯備液，樣品進樣前，離心，取其上清液，備用；

(2)供試品溶液的制備

取重量比例為80:100:30:8:5:5:5的當歸、益母草、川芎、桃仁、紅花、炙甘草和姜炭七味藥材，粉碎過篩，采用8～15倍量水提取2～3次，每次1～2h，合并水提液，離心，取上清液，經0.22μm的微孔濾膜濾過后，取續濾液作為供試品溶液，備用；

(3)含量測定

取步驟(1)制備得到的混合對照品貯備液，采用逐級稀釋法，用體積濃度80～90％的甲醇稀釋混合對照品貯備液，制成系列不同濃度的對照品溶液，然后取系列不同濃度的對照品溶液按一定的色譜條件進行UHPLC-TQ-MS/MS測定分析，以系列對照品溶液的濃度作為橫坐標x，以測得的相應標準品的峰面積作為縱坐標y，得各對照品的線性回歸方程；

取步驟(2)得到的供試品溶液，按一定的色譜條件進行UHPLC-TQ-MS/MS測定分析，并根據各對照品的線性回歸方程計算供試品溶液中各化合物的含量；

所述的UHPLC-TQ-MS/MS測定分析的色譜分析條件為：

色譜柱：規格為100mm×3mm,1.9m的Thermo Scientific Hypersil GOLD，流動相：A相為0.1％甲酸溶液和B為乙腈，流速：0.4～0.8mL/min，梯度洗脫：0～2min，5％～5％B；2～12min，5％～40％B；12～18min，40％～95％B；18～19min，95％～5％B；19～20min，5％～5％B，柱溫：30～35℃，進樣體積為2μL；

質譜檢測條件：

采用多反應檢測模式；離子源溫度：150℃；脫溶劑氣溫度：520℃；毛細管電壓：3.0kV；錐孔氣流量：30L/h；碰撞氣流量：0.15mL/min；脫溶劑氣流量：1000L/h；取樣錐孔電壓及碰撞能量見下表；