[發(fā)明專利]新生化顆粒的質(zhì)量檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610878776.2
• 申請日: 2016-09-30
• 公開（公告）號: CN106645450B
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 唐于平;孫大正;黃盛良;段金廒
• 申請（專利權(quán)）人: 南京中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 楊海軍

本發(fā)明公開了一種新生化顆粒的質(zhì)量檢測方法，本發(fā)明通過UHPLC?TQ?MS/MS測定分析，實(shí)現(xiàn)對新生化顆粒中的27個化學(xué)成分含量進(jìn)行檢測。該方法操作簡便，穩(wěn)定性好，可以客觀、全面、準(zhǔn)確地評價新生化顆粒的質(zhì)量，對控制質(zhì)量和保證療效具有重要意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方的質(zhì)量控制方法，具體涉及一種具有治療產(chǎn)后出血、流產(chǎn)后子宮修復(fù)等產(chǎn)后疾病的新生化顆粒的質(zhì)量檢測方法。

背景技術(shù)

中藥在預(yù)防和治療疾病方面扮演著尤為重要的作用。中藥配伍是在中國獨(dú)特文化下影響而形成的獨(dú)特的藥物使用方式，臨床上幾味中藥通常配伍使用以期達(dá)到增效減毒的作用。新生化顆粒來源于清代傅青山的婦科名著《傅青主女科》的“生化湯”，由當(dāng)歸、益母草、川芎、桃仁、干姜、紅花和甘草組成，具有活血、止痛、祛瘀的功效，歷來被稱為“產(chǎn)后第一方”。臨床上，新生化顆粒常用來治療產(chǎn)后出血、流產(chǎn)后子宮修復(fù)等產(chǎn)后疾病。

復(fù)方中化學(xué)成分在配伍前后的定性和定量分析是研究復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的首要環(huán)節(jié)。新生化顆粒的有效成主要分為以下五類：芳香酸類、苯酞類、生物堿類、黃酮類和姜辣素類，這五類物質(zhì)與新生化顆粒的活血、養(yǎng)血和止痛功效緊密相連。目前，對新生化顆粒中有效成分的研究，主要在于檢測新生化顆粒單味藥中有效成分的溶出度，對新生化顆粒中有效成分配伍前后化學(xué)成分變化規(guī)律的研究涉及較少。通常，新生化顆粒中的有效成分的含量在配伍前后會發(fā)生較大變化，這也是發(fā)揮其藥效的潛在物質(zhì)基礎(chǔ)，由于新生化顆粒中化合物結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性，常規(guī)的分析儀器很難達(dá)到較好的分析效果。近來，超高效液相色譜-三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜(UHPLC-TQ-MS/MS)由于其具有高選擇性、高靈敏度的特點(diǎn)，已經(jīng)被成功的用于對復(fù)雜成分的分析。

因此，開發(fā)一種簡便易行、檢測成本低廉，且可同時定量分析多種活性成分的分析方法，對于新生化顆粒的質(zhì)量控制具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，采用超高效液相色譜-三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜(UHPLC-TQ-MS/MS)，同時檢測新生化顆粒中27種活性成分。該方法簡便、快速，穩(wěn)定性好，可以客觀、全面、準(zhǔn)確地評價新生化顆粒制劑的質(zhì)量，對控制質(zhì)量和保證療效具有重要意義。

技術(shù)方案：為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：

1.一種新生化顆粒的質(zhì)量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)對照品溶液的制備

分別精密稱定適量的對照品，用甲醇溶解配制成以下對照品溶液：1號樣品：葫蘆巴堿，2號樣品：鹽酸水蘇堿，3號樣品：尿嘧啶，4號樣品：原兒茶酸，5號樣品：羥基紅花黃色素A，6號樣品：綠原酸，7號樣品：苦杏仁苷，8號樣品：咖啡酸，9號樣品：鹽酸益母草堿，10號樣品：蘆丁，11號樣品：對香豆酸，12號樣品：甘草苷，13號樣品：阿魏酸，14號樣品：山奈酚-3-O-β-D-蕓香糖苷，15號樣品：姜酮，16號樣品：異甘草苷，17號樣品：洋川芎內(nèi)酯I，18號樣品：洋川芎內(nèi)酯H,19號樣品：甘草素，20號樣品：槲皮素，21號樣品：山奈酚，22號樣品：甘草酸，23號樣品：6-姜辣素，24號樣品：洋川芎內(nèi)酯A，25號樣品：藁本內(nèi)酯，26號樣品：正丁烯基苯酞和27號樣品：6-姜烯酚的混合對照品貯備液，低溫條件下貯藏對照品貯備液，樣品進(jìn)樣前，離心，取其上清液，備用；

(2)供試品溶液的制備

取重量比例為80:100:30:8:5:5:5的當(dāng)歸、益母草、川芎、桃仁、紅花、炙甘草和姜炭七味藥材，粉碎過篩，采用8～15倍量水提取2～3次，每次1～2h，合并水提液，離心，取上清液，經(jīng)0.22μm的微孔濾膜濾過后，取續(xù)濾液作為供試品溶液，備用；

(3)含量測定