[發(fā)明專利]一種吉他霉素化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610877176.4
• 申請日: 2016-09-30
• 公開（公告）號: CN107677660B
• 公開（公告）日: 2020-11-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 谷正;趙凱;劉芳;許晨;李健;李云龍
• 申請（專利權(quán)）人: 廈門中集信檢測技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明涉及一種高靈敏度、高準(zhǔn)確度、高精確度的吉他霉素化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，包括盒體、設(shè)在盒體內(nèi)的酶標(biāo)板和設(shè)在盒體內(nèi)的試劑。通過大量試驗篩選具有優(yōu)良性質(zhì)的特異性的單克隆抗體，以及確定反應(yīng)液中各組分的合適濃度，本發(fā)明的吉他霉素化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒能夠快速、精準(zhǔn)的檢測到較低含量的吉他霉素，適合于檢測豬或禽類的動物性食品中對吉他霉素藥物殘留量檢測需求。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種化學(xué)發(fā)光試劑盒，具體為一種用于檢測吉他霉素的化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒。

背景技術(shù)

隨著人們生活質(zhì)量的提高，食品安全問題越來越為廣大消費者所關(guān)注，特別是農(nóng)藥和抗生素等藥物殘留問題更是廣大消費者所關(guān)注的焦點問題。在食品安全這個全球關(guān)注的熱點問題上，如何快速、準(zhǔn)確地檢測食品安全的問題已成為重中之重。要檢測抗生素在食品中的殘留，必須選擇特異性強(qiáng)、靈敏度高、高效快速的檢測方法。因此，研究各種抗生素類殘留檢測的方法，提高其靈敏度與選擇性具有十分重要的意義。

抗生素廣泛應(yīng)用于治療人和動物的多種細(xì)菌性感染疾病。作為臨床用藥的抗生素類常常在短期內(nèi)服用，主要是通過注射、口服、飲水等方式進(jìn)入動物體內(nèi)。在休藥期結(jié)束前注射部位的肌肉和奶中會殘留超量的抗生素。獸醫(yī)在臨床用藥時，將不同的抗生素聯(lián)合起來使用，也容易造成抗生素類藥物在動物體內(nèi)殘留，導(dǎo)致動物性食品污染。有些抗生素類還被作為藥物添加劑，用來預(yù)防動物細(xì)菌性疾病和促進(jìn)動物生長而被長期使用。如土霉素添加劑、金霉素添加劑等經(jīng)口腔進(jìn)入動物體內(nèi)，短時間不能完全排出，極易在體內(nèi)蓄積，造成動物性食品中的抗生素殘留。

現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展引起的抗生素的濫用，進(jìn)而導(dǎo)致的大量藥物殘留已經(jīng)成為威脅人類健康的嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)社會問題。動物源性食品中抗菌素污染的問題已引起全世界廣泛關(guān)注，許多國家均對各種動物源性食品中的抗菌素殘留提出限量標(biāo)準(zhǔn)。我國農(nóng)業(yè)部在2002年公告的《關(guān)于動物性食品中獸藥最高殘留限量的通知》中，規(guī)定了92種動物性食品中獸藥最高殘留限量，其中吉他霉素(Kitasamycin)在豬/禽的肌肉、肝、腎組織中的最高殘留限量為200μg/kg。吉他霉素又稱柱晶白霉素,是由北里鏈霉菌產(chǎn)生的一種多組分大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，對多數(shù)革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌及霉形體均有較強(qiáng)抗菌活性，用于防治畜禽細(xì)菌感染和霉形體病等以及用作促生長劑，近年來，隨著吉他霉素的廣泛應(yīng)用，其在動物性食品中的殘留問題也日益突出。

因此，亟需建立能夠快速、靈敏地檢測吉他霉素殘留的檢測方法。目前已有一些監(jiān)測方法，包括傳統(tǒng)的儀器法，微生物檢測法和新興的酶聯(lián)免疫檢測法(ELISA)等。傳統(tǒng)檢測藥物殘留的儀器分析方法包括HPLC、LC-UV、LC-MS和LC-MS-MS等。這些方法優(yōu)點是準(zhǔn)確、穩(wěn)定、特異性好，可以作為標(biāo)準(zhǔn)方法，但儀器設(shè)備昂貴，笨重，需要大量的溶劑，對操作人員要求很高，樣品前處理復(fù)雜、費時、費力、不易普及，不適合對大規(guī)模的樣品進(jìn)行即時檢測。微生物檢測法雖然可以進(jìn)行大量樣品的即時檢測，但是特異性差，不能進(jìn)行準(zhǔn)確的定性定量分析。酶聯(lián)免疫檢測法(ELISA)克服了以上方法的缺點，是一種快速、靈敏、方便的檢測方法，可以用于大量樣品的即時檢測。

但市場對于提高檢測方法的靈敏度、精準(zhǔn)度總是有更高的需要。相對于普通的酶聯(lián)免疫檢測法，化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)是一種有著更高的靈敏度，更寬的線性范圍，更適合藥物殘留檢測的檢測方法。它是將發(fā)光免疫分析和免疫反應(yīng)相結(jié)合，而建立的檢測微量抗原或抗體的新型標(biāo)記免疫分析技術(shù)，一種非放射性標(biāo)記免疫分析技術(shù)。

目前已有相關(guān)技術(shù)的專利申請，例如申請?zhí)枮镃N201210049826.8，或CN201210049798.X等。但為了滿足進(jìn)一步降低檢測限，提高檢測方法的靈敏度，提高檢測試劑盒的準(zhǔn)確度、精密度的要求，需要進(jìn)一步改進(jìn)檢測試劑盒以及檢測方法。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術(shù)問題，發(fā)明人篩選了不同的單克隆抗體，進(jìn)行了大量的試驗后，得到了一種具有良好效果的單克隆抗體，并在此基礎(chǔ)上制備了一種具有高靈敏度、高特異性、且具有高反應(yīng)速度、準(zhǔn)確度和精密度的吉他霉素的化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測試劑盒。