[發(fā)明專利]一種富含γ?亞麻酸的螺旋藻糖脂制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610873024.7
• 申請(qǐng)日: 2016-09-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107874253A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-04-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡強(qiáng);王貴春;喻正保;張婉婉;薛易君;劉麗;楊小紅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)家開(kāi)發(fā)投資公司;中國(guó)電子工程設(shè)計(jì)院
• 主分類號(hào): A23L33/105
• 分類號(hào): A23L33/105;A23L33/115;A23L33/12
• 代理公司: 北京智為時(shí)代知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11498
• 代理人: 王加嶺,楊靜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及保健食品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種富含γ-亞麻酸的螺旋藻糖脂制備方法。

背景技術(shù)

螺旋藻(spirulina)是一類低等植物，在分類上屬于藍(lán)藻門，顫藻科^[1]，世界上己知螺旋藻共有36種，多為淡水種類，目前，大規(guī)模生產(chǎn)的螺旋藻品種有極大螺旋藻(Spirulina maximum)、鈍頂螺旋藻(Spirulina platensis)和鹽澤螺旋藻(Spirulina subsalsa)。

螺旋藻富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其中蛋白質(zhì)含量豐富，氨基酸組成比例恰當(dāng)，被認(rèn)為是目前人類已知的蛋白質(zhì)含量最高、質(zhì)量最好的食品。而且螺旋藻中含有多種生物活性物質(zhì)，其中糖脂含量豐富，包括單半乳糖二乙酰甘油酯(MGDG，mono-galactosyl-diaclyglycerol)，雙半乳糖二乙酰甘油酯(DGDG，digalactosyl-diaclyglycerol)，硫代異鼠李糖二乙酰甘油酯(SQDG，sulfoqiuvonosyldiaclyglycerol)，具有降血脂、抗炎、抗腫瘤等活性，這三種油脂的分子結(jié)構(gòu)如圖1所示。螺旋藻富含的γ-亞麻酸主要存在于MGDG的Sn-1或Sn-2位，是糖脂主要的功能活性基團(tuán)。

γ-亞麻酸(GLA，Gamma linolenic Acid)屬于ω-6系列多不飽和脂肪酸^[2]，具有調(diào)節(jié)血壓，降低膽固醇，預(yù)防糖尿病、癌癥等功效^[3]。γ-亞麻酸主要分布于植物和微生物中，其中研究最為廣泛的為月見(jiàn)草和琉璃苣，月見(jiàn)草油中含7～10％、琉璃苣油中含18～26％，由于近幾年國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)需求增大，為尋求可替代資源，國(guó)內(nèi)外研究者發(fā)現(xiàn)，已規(guī)?；囵B(yǎng)的螺旋藻中富含大量的γ-亞麻酸，占細(xì)胞干重的1.1～1.5％左右，占總脂肪酸的18～21％^[4]，可見(jiàn)，螺旋藻是獲取γ-亞麻酸潛在來(lái)源，具有很好地發(fā)展前景。

目前，對(duì)于富含γ-亞麻酸的螺旋藻糖脂制備的專利及相關(guān)文獻(xiàn)研究，提到的提取純化方法主要集中在超臨界二氧化碳萃取技術(shù)、尿素包合法等。但前者對(duì)設(shè)備要求高，且提取率并沒(méi)有顯著提高；后者有尿素、甲醇等殘留，易形成可疑致癌物，不可直接應(yīng)用于食品或保健品生產(chǎn)。因此，本發(fā)明選用綠色安全、在食品工業(yè)中批準(zhǔn)使用的乙醇為提取溶劑，發(fā)明了一種安全易操作的提取方式，同時(shí)對(duì)乙醇粗提取物中富含γ-亞麻酸的螺旋藻糖脂進(jìn)行分離純化，富集γ-亞麻酸。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有方法的上述缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于提供一種綠色低毒溶劑提取、分離純化富含γ-亞麻酸的螺旋藻糖脂制備方法，用以提高γ-亞麻酸的提取效率和純度。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明選用食品級(jí)乙醇作為提取溶劑，在溫和的條件下進(jìn)行螺旋藻粗脂提取，并采用食品工業(yè)中允許添加使用的食品加工助劑進(jìn)行分離純化，以獲取富含γ-亞麻酸的螺旋藻糖脂。該法包括從螺旋藻中提取粗脂成分，優(yōu)化影響萃取效率的工藝參數(shù)，分離純化富含γ-亞麻酸的螺旋藻糖脂，分析其中的總脂肪酸及GLA含量。

具體地，本發(fā)明首先提供了一種富含γ-亞麻酸的螺旋藻糖脂制備方法，該方法包括以下步驟：

S1：乙醇浸提，將螺旋藻粉與乙醇按1:6～10(g/mL)的比例混合均勻，恒溫?cái)嚢杼崛?，提取溫度可在室溫?0℃之間進(jìn)行調(diào)節(jié)，提取時(shí)間為30～120min；

S2：螺旋藻粗脂獲取，經(jīng)乙醇提取后的粗提物，高速離心分離藻渣及上清液，上清液利用真空濃縮脫除有機(jī)溶劑，真空冷凍干燥后即得螺旋藻粗脂提取物；

S3：柱層析分離純化，柱層析分離純化步驟S2得到的螺旋藻粗脂提取物，上樣量與柱層析硅膠量按1:30～200(g/g)上樣，柱層析流動(dòng)相為乙醇和正己烷混合溶劑。

具體地，所述柱層析分離純化步驟為：

S3-1：裝柱，將硅膠與適量洗脫液調(diào)成混懸液，采用濕法裝柱；

S3-2：上樣，螺旋藻粗脂提取物復(fù)溶于乙醇/正己烷混合溶劑，柱層析硅膠分離純化螺旋藻粗脂提取物，干(濕)法上樣均可，上樣量與柱層析硅膠量按1:30～200(g/g)；上樣量與柱層析硅膠量按更優(yōu)選為1:200(g/g)；

S3-3：洗脫，裝柱上樣后采用乙醇/正己烷混合體系梯度洗脫，乙醇/正己烷比例為1:1～10(v/v)之間調(diào)節(jié)，洗脫0.5～3.0個(gè)柱體積，按體積收集洗脫液，50～100mL/瓶；

優(yōu)選的，S1中提取溫度為35-50℃，螺旋藻粉與乙醇的比例為1：6～8。更優(yōu)選的，螺旋藻粉與乙醇的比例為1：7。