[發(fā)明專利]一種磁性固相萃取結(jié)合同位素二甲基化標(biāo)記分析磺胺類物質(zhì)的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610867566.3
• 申請(qǐng)日: 2016-09-30
• 公開（公告）號(hào): CN106645449B
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳明火;粟靖云;占敬敬;胡玉峰;龔勛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 大連理工大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 大連理工大學(xué)專利中心 21200
• 代理人: 梅洪玉;潘迅

1.一種磁性固相萃取結(jié)合同位素二甲基化標(biāo)記分析磺胺類物質(zhì)的方法，其特征在于以下步驟：

第一步，取待測(cè)樣品測(cè)其總氮，根據(jù)待測(cè)樣品中的總氮，計(jì)算得到所需標(biāo)記試劑甲醛的用量；所述的甲醛與待測(cè)樣品總氮的摩爾比為50:1-100:1；

第二步，將20-50mg的磁性納米材料加入待測(cè)樣品溶液中，同時(shí)將等量磁性納米材料加入已知濃度的磺胺混標(biāo)溶液中，震蕩實(shí)現(xiàn)磁性碳納米材料對(duì)磺胺類物質(zhì)的吸附和富集，待測(cè)樣品溶液震蕩后得到樣品A，磺胺混標(biāo)溶液震蕩后得到樣品B；所述的待測(cè)樣品溶液的體積為1-200mL；所述的磺胺混標(biāo)溶液B的體積與待測(cè)樣品溶液A的體積相同；所述的磺胺混標(biāo)溶液的濃度為0.05-2μg/L；

第三步，將樣品A和樣品B在外加磁場(chǎng)下磁分離后，倒掉吸附后的殘留液，再加入0.5-2mL濃度為50mM的磷酸鈉緩沖溶液，震蕩分散后，分別得到樣品A1和樣品B1；在樣品A1和樣品B1中分別加入CH₂O和CD₂O溶液后，再分別加入0.06M的NaBH₃CN溶液，充分混合后放置于試管混合器上，在20-30℃條件下進(jìn)行標(biāo)記反應(yīng)10-30min后，得到的樣品分別為A2和B2；所述的NaBH₃CN溶液的體積為60-100μL；所述的標(biāo)記反應(yīng)體系的pH值5-8.5；所述的磷酸鈉緩沖溶液的pH為7.5；

第四步，在樣品A2和B2中加入15-30μL濃度為1％的氨水溶液，進(jìn)行終止反應(yīng)；再加入純甲酸對(duì)樣品進(jìn)行酸化，分別得到樣品A3和B3；

第五步，標(biāo)記反應(yīng)結(jié)束后進(jìn)行磁分離，倒掉標(biāo)記溶液；先在樣品A3、B3中分別加入50％的乙腈溶液進(jìn)行淋洗，再將二者混合后，磁分離去掉淋洗液得到樣品C；在樣品C中加入80％乙腈溶液洗脫，磁分離后收集洗脫液用于LC-MS分析；

第六步，通過(guò)比較輕重同位素的色譜峰的保留時(shí)間和面積，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品待測(cè)樣品中的磺胺類化合物的定性及定量分析。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種磁性固相萃取結(jié)合同位素二甲基化標(biāo)記分析磺胺類物質(zhì)的方法，其特征在于，所述的第二步磁性納米材料進(jìn)行乙腈清洗、超純水平衡處理。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種磁性固相萃取結(jié)合同位素二甲基化標(biāo)記分析磺胺類物質(zhì)的方法，其特征在于，所述的的第四步中純甲酸的體積為8-12μL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種磁性固相萃取結(jié)合同位素二甲基化標(biāo)記分析磺胺類物質(zhì)的方法，其特征在于，所述的第五步中對(duì)樣品C進(jìn)行洗脫的乙腈溶液中體積為100-500μL。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種磁性固相萃取結(jié)合同位素二甲基化標(biāo)記分析磺胺類物質(zhì)的方法，其特征在于，所述的第五步中對(duì)樣品C進(jìn)行洗脫的乙腈溶液中體積為100-500μL。