[發明專利]馮了性風濕跌打藥酒指紋圖譜的建立方法及其指紋圖譜

有效

• 申請號: 201610866655.6
• 申請日: 2016-09-29
• 公開（公告）號: CN106290677B
• 公開（公告）日: 2018-01-02
• 發明（設計）人: 楊雄輝;關紅暉;霍嘉茵;林淑明;馮麗華;楊劍湖
• 申請（專利權）人: 國藥集團馮了性（佛山）藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86;G01N30/06
• 代理公司: 北京思元知識產權代理事務所(普通合伙)11598
• 代理人: 霍雪梅,余光軍

技術領域

本發明涉及馮了性風濕跌打藥酒指紋圖譜的建立方法，還涉及所述方法建立的馮了性風濕跌打藥酒指紋圖譜，屬于馮了性風濕跌打藥酒指紋圖譜的建立領域。

背景技術

馮了性風濕跌打藥酒由丁公藤、麻黃、桂枝、枳殼、陳皮、黃精等27味中藥材用白酒浸漬而成，可口服、可外用，具有祛風除濕，活血止痛的功效。用于風寒濕痹，手足麻木，腰腿酸痛；跌撲損傷，瘀滯腫痛等癥。馮了性風濕跌打藥酒的質量標準收載于自1990年版起的《中國藥典》，《中國藥典》2015版一部馮了性風濕跌打藥酒項下的質量標準涵蓋性狀(東莨菪內酯、鹽酸麻黃堿、厚樸酚、和厚樸酚、桂皮醛、去氫木香內酯、丹皮酚對照品及桂枝、木香對照藥材)薄層鑒別，乙醇量、總固體、甲醇量的檢查等檢驗指標，難以全面反映中藥復方制劑的整體性和內在質量的全面控制。

中藥指紋圖譜技術已成為國內外公認的鑒別中藥品種和評價中藥質量的最有效手段。指紋圖譜是基于對中藥物質群整體作用的認識，借助于波譜和色譜等技術獲得中藥化學成分的光譜或色譜圖，是實現鑒別中藥真實性、評價質量一致性和產品穩定性的可行模式。指紋圖譜包括了對已知成分和未知成分的分析，反映的化學成分信息(具體表現為相對保留時間和相對峰面積)具有高度特異性和選擇性，可較充分地反映出中藥復雜混合體系中各種化學成分量分布的整體狀況。色譜指紋圖譜由于能夠清晰地反映方劑中所含的主要成分情況，更具特征性和指紋性，因此各種色譜方法在方劑的指紋圖譜質量控制研究中有著更普遍的應用。因此，建立一種馮了性風濕跌打藥酒的指紋圖譜，將為馮了性風濕跌打藥酒的質量評價，為其生產和質量控制提供科學依據。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種馮了性風濕跌打藥酒指紋圖譜的建立方法，該方法簡便易行、穩定可靠，所建立的馮了性風濕跌打藥酒指紋圖譜靈敏度高，穩定性好，能夠用于馮了性風濕跌打藥酒的質量控制。

為解決上述技術問題，本發明所采取的技術方案是：

本發明公開了一種馮了性風濕跌打藥酒指紋圖譜的建立方法，包括以下步驟：(1)將馮了性風濕跌打藥酒稀釋，過濾，收集濾液作為供試品溶液；(2)將供試品溶液進行高效液相色譜分析，得到HPLC指紋圖譜；(3)根據HPLC指紋圖譜中色譜峰的相對保留時間確定共有峰；(4)從共有峰中選擇特征指紋峰，得到馮了性風濕跌打藥酒指紋圖譜。

其中，步驟(2)所述高效液相色譜分析的條件包括：Agilent高效液相色譜儀；色譜柱為Kromasil C18柱(規格為4.6×250mm，5μm)或Ecosil C18柱(規格為4.6×250mm，5μm)；流動相選自：按體積分數計，甲醇(A，即流動相A，下同)-0.1％醋酸：0.1％磷酸＝1：1的水溶液(B，即流動相B，下同)、甲醇(A)-0.1％甲酸(B)、甲醇(A)-0.2％醋酸(B)、乙腈(A)-0.1％磷酸(B)或甲醇(A)-0.1％磷酸(B)中的任意一種；梯度洗脫；檢測波長為210-360nm；流速1ml/min；柱溫30℃；進樣量5μl。

作為本發明的優選技術方案，所述流動相為：按體積比計，甲醇(A)-0.1％醋酸：0.1％磷酸＝1：1的水溶液(B)。所述梯度洗脫的步驟包括：按照體積分數計，0-20min，A為12％；20-30min，A由12％遞升到25％；30-50min，A由25％遞升到38％；50-60min，A為38％；60-75min，A由38％遞升到60％；75-95min，A由60％遞升到90％；90-100min，A為90％。本發明所述檢測波長為210nm和300nm；優選的，所述檢測波長為：0-10min為300nm，10-20min為210nm，20-100min為300nm。

本發明以東莨菪苷、東莨菪內酯、綠原酸、鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿、桂皮醛、新橙皮苷、柚皮苷為參照物峰確定了馮了性風濕跌打藥酒的HPLC指紋圖譜。本發明方法通過比較10批供試品溶液的HPLC指紋圖譜，根據色譜圖中各色譜峰的相對保留時間，確定了15個共有峰為特征指紋峰；所述15個共有峰以綠原酸為參照的相對保留時間分別為：