[發明專利]一種從細胞懸液中提取和純化包裹藥物的細胞囊泡的方法有效
| 申請號: | 201610866539.4 | 申請日: | 2016-09-30 |
| 公開(公告)號: | CN107875124B | 公開(公告)日: | 2021-08-06 |
| 發明(設計)人: | 張一;李凱 | 申請(專利權)人: | 湖北盛齊安生物科技股份有限公司 |
| 主分類號: | A61K9/127 | 分類號: | A61K9/127;A61K47/46;A61K31/519;A61K31/704;A61P35/00 |
| 代理公司: | 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006 | 代理人: | 黃韌敏 |
| 地址: | 430000 湖北省武漢市東*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 細胞 懸液中 提取 純化 包裹 藥物 方法 | ||
1.一種從細胞懸液中提取和純化包裹藥物的細胞囊泡的方法,包括:
1)將細胞懸液過濾,收集濾液;
2)將步驟1)收集的濾液離心,收集沉淀,獲得包裹藥物的細胞囊泡;
其中步驟1)所述的過濾為將所述細胞懸液通過孔徑為5μm-10μm的濾膜或濾芯過濾;
步驟2)所述的離心為以100-100000g的離心力高速離心;
其中,所述的細胞懸液的制備方法為:
用化學、物理或生物方法使細胞發生凋亡,將凋亡的細胞與腫瘤治療藥接觸,使得所述腫瘤治療藥被包裹進入凋亡的細胞,所述的包裹藥物的細胞囊泡為凋亡細胞釋放的含有腫瘤治療藥的微顆粒,所述的細胞懸液為包含所述細胞、細胞碎片和細胞囊泡的混合液。
2.根據權利要求1所述的提取和純化包裹藥物的細胞囊泡的方法,其中所述的濾膜或者濾芯的材質為選自聚丙烯、聚偏氟乙烯、聚四氟乙烯和尼龍中的一種。
3.根據權利要求2所述的提取和純化包裹藥物的細胞囊泡的方法,其中所述的濾膜選自PALL公司的聚丙烯J100047050、Millipore公司的聚偏氟乙烯SVWG04700、Millipore公司的聚四氟乙烯LSWG04700、PALL公司的聚四氟乙烯JCWP04700和PALL公司的尼龍NCG047100中的一種。
4.根據權利要求2所述的提取和純化包裹藥物的細胞囊泡的方法,其中所述的濾芯為PALL公司的聚丙烯KA3J100P1。
5.根據權利要求1所述的提取和純化包裹藥物的細胞囊泡的方法,其中所述的高速離心為以100-100000g的離心力離心30-90分鐘。
6.根據權利要求1所述的提取和純化包裹藥物的細胞囊泡的方法,其中所述細胞為真核細胞。
7.根據權利要求1所述的提取和純化包裹藥物的細胞囊泡的方法,其中所述細胞為腫瘤細胞或紅細胞。
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