[發(fā)明專利]用于檢測腫瘤型M2丙酮酸激酶的化學發(fā)光免疫試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610864283.3 | 申請日： | 2016-09-29 |
| 公開（公告）號： | CN106405094B | 公開（公告）日： | 2018-03-06 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 陳立國;鄒偉權(quán);張亞麗;李慶祥;母潤紅;王濤;蘇焱 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣州華弘生物科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/577 | 分類號： | G01N33/577;G01N33/574;G01N33/573 |
| 代理公司： | 廣州勝沃園專利代理有限公司44416 | 代理人： | 張帥 |
| 地址： | 510530 廣東省廣州市高新技*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 檢測 腫瘤 m2 丙酮酸 激酶 化學 發(fā)光 免疫 試劑盒 | ||
1.一種腫瘤型M2丙酮酸激酶(TU M2-PK)的定量測定試劑盒，其包含的試劑有TU M2-PK磁分離試劑，酶標記的TU M2-PK 抗體溶液，標準品，洗滌液以及化學發(fā)光底物溶液；
所述TU M2-PK磁分離試劑為含有1mg/ml的偶聯(lián)有抗TU M2-PK單克隆抗體的磁性微球，0.3mg/ml的十八烷基三甲基氯化銨，0.1mg/ml的吐溫20，0.1mg/ml的PEG200的70mmol/L的PBS緩沖液，pH值為8.0；
所述酶標記的TU M2-PK抗體溶液是含有1mg/ml辣根過氧化酶標記的抗TU M2-PK 單克隆抗體和1mg/ml BSA的50mmol/L的PBS緩沖液，pH值為8.0；
所述的標準品為不同濃度的TU M2-PK標準品溶液，其分別含有0、0.5、1、2、4、8、16、32和64U/ml的TU M2-PK標準品的50mmol/l PBS緩沖液，pH7.4；
洗滌液由在濃度為20mol/L、pH 為7.4的磷酸鹽緩沖液中加入1％的Tween-20 配制而成；
所述化學發(fā)光底物溶液分為發(fā)光底物A溶液和發(fā)光底物B溶液；發(fā)光底物A為0.1M、 pH值為8.5的Tris-HCl緩沖液，且該緩沖液中含有終濃度為 5.0mg/mL的魯米諾，所述發(fā)光底物B為是pH值為4.5的0.1M檸檬酸緩沖液，且該緩沖液中含有終濃度為100 mg/mL的過氧化氫和15mg/mL辣根過氧化氫酶。
2.一種權(quán)利要求1所述的定量測定試劑盒的制備方法，具體步驟如下：
1）TU M2-PK磁分離試劑的制備：采用化學交聯(lián)法將TU M2-PK單克隆抗體和磁性微球偶聯(lián)，磁性微球直徑在1.0μm左右，制備后用PBS緩沖液沖洗三次，然后用70mmol/L的PBS緩沖液重新懸浮，加入終濃度0.3mg/ml的十八烷基三甲基氯化銨、0.1mg/ml的吐溫20和0.1mg/ml的PEG200，調(diào)pH值至8.0即得；
2）酶標記的TU M2-PK抗體溶液的制備：采用NaIO4法標記TU M2-PK單克隆抗體，反應(yīng)后透析純化，然后用20mmol/L的PBS緩沖液溶解，加入終濃度0.5mg/ml酪蛋白，調(diào)pH值至8.0即得；
3）常規(guī)方法配置標準品、洗滌液和化學底物溶液。
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