[發明專利]一種硫酸氫氯吡格雷中甲醛殘留的檢測方法

在審

• 申請號: 201610857515.2
• 申請日: 2016-09-28
• 公開（公告）號: CN107870208A
• 公開（公告）日: 2018-04-03
• 發明（設計）人: 張興爽;沙薇;牛利峰
• 申請（專利權）人: 鄭州泰豐制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種硫酸氫氯吡格雷中甲醛殘留的檢測，屬于基因毒性雜質殘留檢測技術領域。

背景技術

甲醛(formaldehyde)為無色、具有刺激性和窒息性的氣體，商品為其水溶液。易容易水、乙醇等多數有機溶劑。甲醛性質穩定，是一種重要的有機原料，也是染料、醫藥、農藥的原料等。

甲醛是有毒物質,研究表明,甲醛容易與細胞親核物質發生化學反應,形成化合物,導致DNA損傷,國際癌癥機構已將甲醛列為可疑致癌物；甲醛接觸限值:中國MAC為3mg/m3,美國TWA-OSHA為3ppm。

在硫酸氫氯吡格雷的合成工藝中，會有甲醛的殘留，因此需要開發一種方法，測定硫酸氫氯吡格雷中甲醛的殘留。

發明內容

本發明的目的在于提供一種靈敏度低、重復性良好的硫酸氫氯吡格雷中甲醛殘留的檢測方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種硫酸氫氯吡格雷中甲醛殘留的檢測,包含以下幾個步驟：

（1）衍生化試劑配制：

2，4-二硝基苯肼乙腈溶液（濃度5%）：精密稱取25mg的2，4-二硝基苯肼對照品于100ml容量瓶中，加入適量乙腈溶解后，用乙腈稀釋定容至刻度，振搖均勻后，精密移取5ml該溶液置于50ml容量瓶中，用乙腈稀釋定容至刻度后，搖勻備用。

0.1mol/L鹽酸：精密移取9ml鹽酸于100ml容量瓶中，加水稀釋并定容至刻度；精密移取上述溶液10ml于100ml容量瓶中，加水稀釋并定容至刻度。

（2）溶劑配制：溶劑（甲醇：水=1:9）：分別量取100ml甲醇和900ml水，混合均勻。

（3）空白溶劑：精密移取30ml溶劑于50ml容量瓶中，加入5ml的2，4-二硝基苯肼乙腈溶液（濃度5%）和0.1mol/L鹽酸10ml。

（4）對照品溶液：精密稱取55.6mg的甲醛對照品水溶液于含有10ml左右水的100ml容量瓶中，加水稀釋后，定容至刻度，搖勻，標為對照品儲備液#1；精密移取1ml儲備液#1于100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻后，標示為對照品儲備液#1；精密移取5ml儲備液#2于50ml容量瓶中，加入25ml溶劑，再加入5ml的2，4-二硝基苯肼乙腈溶液（濃度5%），然后再加入0.1mol/L鹽酸10ml，搖勻后密閉

（5）樣品溶液：精密稱取500mg硫酸氫氯吡格雷于50ml容量瓶中，加5ml甲醇溶解后，再加入25ml水，然后加入5ml的2，4-二硝基苯肼乙腈溶液（濃度5%）和0.1mol/L鹽酸10ml，搖勻后密閉。

（6）衍生化：將上述空白溶劑、對照品溶液和樣品溶液置于50℃-60℃恒溫震蕩箱中2-3h，取出后放冷至室溫，加溶劑稀釋至刻度，搖勻。

（7）檢測：采用HPLC進行檢測，檢測條件為采用C18柱，規格為3.0*100mm，檢測波長為367nm，流動相采用體積比為4:6的乙腈和0.01mol/L鹽酸水溶液，流速為0.7ml/min。

所述的一種硫酸氫氯吡格雷中甲醛殘留的檢測方法，衍生化試劑2，4-二硝基苯肼的濃度為5%。

標準曲線的制作：取甲醛對照品儲備液#2和衍生化試劑衍生化后，稀釋配制成40ng/ml、30ng/ml、20ng/ml、10ng/ml和5ng/ml的標準溶液，采用HPLC進行檢測，檢測條件為采用C18柱，規格為3.0*100mm，檢測波長為367nm，流動相采用體積比為4:6的乙腈和0.01mol/L鹽酸水溶液，流速為0.7ml/min。將得到的數值與濃度繪制成標準曲線。

回收率測定：在硫酸氫氯吡格雷樣品溶液中分別加入2ml、1ml和0.5ml甲醛對照品儲備液#2，配制成40ng/ml、20ng/ml和10ng/ml的回收率溶液，同時配制空白溶劑、樣品溶液和對照溶液，計算回收率。

本發明所達到的有益效果：

本發明的檢測方法簡單易操作，靈敏度低、重現性好；出峰時間為3.0min；經計算，在5ng/mL-40ng/mL的范圍內線性關系良好，相關系數r為0.9985,三個由低至高濃度的回收率分別為84.6%、89.5%和95.1% 。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步描述。

實施例1：

本實施例中，一種硫酸氫氯吡格雷中甲醛殘留的檢測，包括以下幾個步驟：

（1）衍生化試劑配制：