[發明專利]一種從動物胎及其胎盤制備活性蛋白肽凍干粉的方法

在審

• 申請號: 201610844115.8
• 申請日: 2016-09-02
• 公開（公告）號: CN106699838A
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 龐海;劉爽;張鶴青;金家福;張全
• 申請（專利權）人: 吉林金梓源生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07K1/36
• 分類號: C07K1/36;C07K1/34
• 代理公司: 上海百一領御專利代理事務所(普通合伙)31243
• 代理人: 馬育麟

1.一種從動物胎及其動物胎盤制備活性蛋白肽凍干粉的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

1)新鮮冷凍動物胎及其動物胎盤，切碎后加入5-10倍體積的水，過夜浸泡除去血液成分，骨泥磨磨漿后，加入20-40倍體積的2-10％酸浸提6-12小時，14000轉/離心，收集清液得蛋白肽粗品；

2)蛋白肽粗品加3-5重量體積去離子水，攪拌，調pH至中性或微堿性，得蛋白肽粗品中性或微堿性液。

3)蛋白肽粗品中性或微堿性液用0.2微米的濾膜過濾，過濾液用400-500道爾頓的納濾濾脫鹽3-5次，再濃縮到含蛋白肽4-10％，除菌過濾，冷凍干燥制備羊胎及其胎盤蛋白肽凍干粉。

上述的脫鹽、濃縮步驟如下：先納濾膜濃縮；然后加水稀釋到原體積時再進行納濾膜濃縮以達到脫鹽的目的，反復3-5次；上述的納濾膜為截留分子量在400-500之間的納濾膜。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

1)新鮮冷凍動物胎及其動物胎盤，切碎后加入5-10倍體積的水，過夜浸泡除去血液成分，骨泥磨磨漿后，加入20-40倍體積的2-5％醋酸浸提8-12小時，14000轉/離心，收集清液得蛋白肽粗品；

2)蛋白肽粗品加3-5重量體積去離子水，攪拌，調pH7-9.0，得蛋白肽粗品中性或微堿性液。

3)蛋白肽粗品中性或微堿性液用0.2微米的濾膜過濾，過濾液用400-500道爾頓的納濾濾脫鹽3次，再濃縮到含蛋白肽4-10％，除菌過濾，冷凍干燥制備羊胎及其胎盤蛋白肽凍干粉。

上述的脫鹽、濃縮步驟如下：先納濾膜濃縮；然后加水稀釋到原體積時再進行納濾膜濃縮以達到脫鹽的目的，反復3次；上述的納濾膜為截留分子量在400-500之間的納濾膜。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

1)新鮮冷凍動物胎及其動物胎盤，切碎后加入5-10倍體積的水，過夜浸泡除去血液成分，骨泥磨磨漿后，加入20-40倍體積的2-5％醋酸浸提8-12小時，14000轉/離心，收集清液得蛋白肽粗品；

2)蛋白肽粗品加3-5重量體積去離子水，攪拌，調pH7-7.5，得蛋白肽粗品中性液。

3)蛋白肽粗品中性液用0.2微米的濾膜過濾，過濾液用400-500道爾頓的納濾濾脫鹽3次，再濃縮到含蛋白肽4-10％，除菌過濾，冷凍干燥制備羊胎及其胎盤蛋白肽凍干粉。

上述的脫鹽、濃縮步驟如下：先納濾膜濃縮；然后加水稀釋到原體積時再進行納濾膜濃縮以達到脫鹽的目的，反復3次；上述的納濾膜為截留分子量在400-500之間的納濾膜。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

1)新鮮冷凍動物胎及其動物胎盤，切碎后加入5-10倍體積的水，過夜浸泡除去血液成分，骨泥磨磨漿后，加入20倍體積的3％醋酸浸提8-12小時，14000轉/離心，收集清液得蛋白肽粗品；

2)蛋白肽粗品加3-5重量體積去離子水，攪拌，調pH7-7.5，得蛋白肽粗品中性液。

3)蛋白肽粗品中性液用0.2微米的濾膜過濾，過濾液用400-500道爾頓的納濾濾脫鹽3次，再濃縮到含蛋白肽4-10％，除菌過濾，冷凍干燥制備羊胎及其胎盤蛋白肽凍干粉。

上述的脫鹽、濃縮步驟如下：先納濾膜濃縮；然后加水稀釋到原體積時再進行納濾膜濃縮以達到脫鹽的目的，反復3次；上述的納濾膜為截留分子量在400-500之間的納濾膜。

5.如權利要求1-4所述的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：將屠宰后的懷孕動物，連同胎盤取出包裹的胎兒，取新鮮動物胎及其胎盤10kg，切碎，加100升自來水，浸泡過夜，次日用清水反復沖洗3次，充分去除血水，用膠體磨磨漿，加入500升3％醋酸，攪拌浸提過夜。用14000轉/分離心，收集清液。調pH7.4，用0.2微米的膜板筐過濾機過濾，穿過液用納濾機濃縮到10升，再加入去離子水到30升，攪拌后納濾濃縮，反復4次，最后濃縮到10升，冷凍干燥，得蛋白肽凍干粉0.2公斤。