[發明專利]一種病毒侵染性克隆的構建方法及其應用有效
| 申請號： | 201610824257.8 | 申請日： | 2016-09-14 |
| 公開（公告）號： | CN106399356B | 公開（公告）日： | 2019-09-24 |
| 發明（設計）人： | 言普;庹德財;付蘭蘭;沈文濤;周鵬 | 申請（專利權）人： | 中國熱帶農業科學院熱帶生物技術研究所 |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82;C12N15/66 |
| 代理公司： | 廣州三環專利商標代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝傳鑫;陳歡 |
| 地址： | 571101 *** | 國省代碼： | 海南;46 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 病毒侵染性 病毒基因組 表達載體 農桿菌 克隆 構建 體外 拼接 大腸桿菌 重組農桿菌 基因片段 線性化表達載體 病毒 線性化處理 拼接產物 穩定現象 直接轉化 重疊序列 基因組 核酸 擴增 侵染 轉化 分段 接種 應用 靈活 | ||
【權利要求書】：
1.一種病毒侵染性克隆的構建方法，其特征在于，包括如下步驟：
1)、通過PCR整體或分段擴增病毒基因組，所得基因組兩端或各基因片段兩端設計有用于體外拼接反應的接頭序列；通過PCR擴增或酶切使表達載體線性化；所得線性化的表達載體兩端設計有用于體外拼接反應的重疊序列；
2)、通過Gibson拼接或In-Fusion拼接方法使病毒基因組或各基因片段與線性化表達載體進行體外拼接；
3)、拼接產物直接轉化農桿菌，獲得含有病毒侵染性克隆的重組農桿菌。
2.如權利要求1所述的方法在構建在大腸桿菌中不穩定的病毒侵染性克隆中的應用。
3.如權利要求1所述的方法在構建馬鈴薯Y病毒屬病毒侵染性克隆中的應用。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述馬鈴薯Y病毒屬病毒包括番木瓜環斑病毒或番木瓜畸形花葉病毒。
下載完整專利技術內容需要扣除積分，VIP會員可以免費下載。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于中國熱帶農業科學院熱帶生物技術研究所，未經中國熱帶農業科學院熱帶生物技術研究所許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201610824257.8/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
