[發(fā)明專利]評(píng)價(jià)結(jié)合抗A或者抗B抗體的層析介質(zhì)的質(zhì)量的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610811535.6
• 申請(qǐng)日: 2016-09-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106802352B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-03-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: M·T·斯通;N·比安;S·拉哈內(nèi)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 默克專利股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/80
• 分類號(hào): G01N33/80
• 代理公司: 永新專利商標(biāo)代理有限公司 72002
• 代理人: 左路;林曉紅

相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用

本申請(qǐng)要求2015年9月8日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)No.62/215,423的優(yōu)先權(quán)，其全部?jī)?nèi)容都以整體援引加入本文。

發(fā)明背景

免疫球蛋白富集的人血漿用于治療許多病征以及用于治療某些先天性缺陷。通常，通過(guò)從具有不同血型的多個(gè)供血者匯集血漿而獲得人血漿。血型可以分為四種主要的的類型。A血型–在紅細(xì)胞上僅具有A抗原(以及血漿中具有B抗體)；B血型–在紅細(xì)胞上僅具有B抗原(以及血漿中具有A抗體)；AB血型–在紅細(xì)胞上具有A和B抗原(但在血漿中既不具有A抗體也不具有B抗體)；和O血型–在紅細(xì)胞上既不具有A抗原也不具有B抗原(A和B抗體都在血漿中)。

重要的是，具有特定血型抗原如A的紅血細(xì)胞從來(lái)都不會(huì)與結(jié)合此抗原的抗體如抗A抗原抗體接觸，因?yàn)榕c此類抗體接觸會(huì)導(dǎo)致其紅血細(xì)胞的凝集和/或溶血，這甚至?xí)?dǎo)致死亡。因此，具有A血型的受血者僅可接受來(lái)自具有A血型或AB血型的供血者的血漿；具有B血型的受血者僅可接受來(lái)自具有B血型或AB血型的供血者的血漿；具有AB血型的受血者僅可接受來(lái)自具有AB血型的供血者的血漿；而具有O血型的受血者被認(rèn)為是萬(wàn)能受血者。不同血型的相容性對(duì)于安全的輸血和器官移植的開(kāi)發(fā)是重要的。然而，在血液衍生的治療藥物的情況中，其中依賴于匯集來(lái)自很多人的血漿以獲得蛋白組分的恒定均值，此時(shí)確保受血者不會(huì)接受不相容的血漿將會(huì)是特別具有挑戰(zhàn)性的。

已經(jīng)開(kāi)發(fā)了很多方法來(lái)選擇性地從血漿中去除血型抗體，包括經(jīng)福爾馬林處理的熱處理紅細(xì)胞(Vox Sang.,1967,12,75-77)、經(jīng)熱處理的具有A和B抗原的大腸桿菌(Escherichia coli)O86:B7(Transfusion,1972,12,98-102)、紅細(xì)胞基質(zhì)粉末、源自免疫吸附劑的紅細(xì)胞基質(zhì)抗原(Chemical Soc.Rev.,1978,7,423-452)、和合成的血型A和B免疫吸附劑(Rev.Fr.Transfus.Immunohematol.1981,24,3,281-287)。

已經(jīng)開(kāi)發(fā)了固相層析免疫吸附劑作為商用層析介質(zhì)，以用以處理源自產(chǎn)物的血液以及也用于在輸血至ABO不相容受血者之前對(duì)于供血者的準(zhǔn)備。利用合成的免疫吸附劑的一個(gè)關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)在于，它們是合成構(gòu)建的而不是源自天然來(lái)源因而在批次與批次之間會(huì)具有更一致的性質(zhì)。

目前，一些具有血型A抗原(A-抗原)配體和/或血型B抗原(B-抗原)配體的商業(yè)可用的層析介質(zhì)包括Glycosorb-ABO裝置(Glycorex Transplantation AB)。此種Glycosorb裝置用于將器官供者準(zhǔn)備為用來(lái)移植至具有不相容血型的患者。所述Glycosorb-ABO裝置中的血型抗原配體從器官供體的血液中結(jié)合并去除血型A抗原抗體(抗-A)和血型B抗原抗體(抗-B)，由此降低器官排斥的風(fēng)險(xiǎn)。

利用層析介質(zhì)純化血液衍生品的一個(gè)主要挑戰(zhàn)在于，缺少有效且可重復(fù)的方法來(lái)評(píng)價(jià)不同介質(zhì)的相對(duì)質(zhì)量，例如，不同批次的相同類型介質(zhì)或者來(lái)自不同來(lái)源的介質(zhì)或者隨著時(shí)間的相同介質(zhì)。

發(fā)明概述

本文所述的實(shí)施方案涉及用于評(píng)價(jià)含有血型A抗原配體或血型B抗原配體的層析介質(zhì)的質(zhì)量的方法。本文所述的方法特別可用于分析或評(píng)價(jià)不同批次的相同類型介質(zhì)與批次之間的質(zhì)量(在使用期間或者在使用之后)以及用于在開(kāi)發(fā)期間將介質(zhì)最優(yōu)化。

在一些實(shí)施方案中，提供了用于比較兩種或更多種親和層析介質(zhì)樣品的質(zhì)量的方法，其均含有附著至固體支持物的血型A抗原配體，其中所述方法包括以下步驟：(a)提供兩種或更多種親和層析介質(zhì)樣品，每種的體積為VR；(b)將每個(gè)樣品與已知濃度C1和體積VM的純化的單克隆IgM-A抗體溶液溫育；(c)獲得每種樣品的上清，并測(cè)量每種上清中IgM-A抗體的濃度C2；使用以下方程式確定每種親和層析介質(zhì)樣品的靜態(tài)結(jié)合能力：

其中所述介質(zhì)樣品對(duì)于IgM-A的靜態(tài)結(jié)合能力與其從樣品中去除抗-A抗體的能力相關(guān)聯(lián)，由此提供了兩種或更多種不同的親和層析介質(zhì)樣品質(zhì)量的比較。