[發明專利]一種生鮮乳新鮮度檢測的方法

有效

• 申請號: 201610798257.5
• 申請日: 2016-08-31
• 公開（公告）號: CN106404818B
• 公開（公告）日: 2018-01-23
• 發明（設計）人: 楊永新;趙小偉;王強軍;齊云霞;黃冬維;程廣龍;趙輝玲
• 申請（專利權）人: 安徽省農業科學院畜牧獸醫研究所
• 主分類號: G01N24/08
• 分類號: G01N24/08
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司11212
• 代理人: 沈尚林

技術領域

本發明涉及一種生鮮乳新鮮度檢測的方法，具體涉及一種檢測牛奶生鮮乳新鮮度的方法。

背景技術

鮮牛乳品質直接或間接影響著牛奶的安全性和產品質量，而新鮮榨取的牛奶溫度一般在36℃左右，隨之要及時冷卻至4℃左右，以便保持奶品質。由于新鮮榨取的奶是最適宜微生物繁殖，如不及時冷卻，會造成微生物的大量繁殖，導致奶成分發生變化，奶品質變差。因此，新鮮榨取的牛奶須迅速冷卻才能在較長時間內保持生鮮乳的品質。但是，低溫儲存時間也會造成乳成分的變化，影響奶品質，其中乳清酸是嘧啶的合成的中間產物，其在加熱條件下是穩定的，但在發酵酸奶中含量下降。此外，乳制品氣味同樣決定牛奶是否被消費者所接受的主要感官質量指標之一，盡管牛奶具有高質量的營養,如果其氣味不佳,就會導致消費者對奶制品的抵制，給奶業發展造成阻力，然而在正常牛奶中三甲胺的含量低于2mg/L，不會影響牛奶的風味，但隨著牛奶新鮮度下降，三甲胺代謝濃度的變化就會影響奶的品質。因此，開發一種檢測準確、靈敏度高的生鮮乳新鮮度檢測方法對牛乳品質進行精準的評估具有重要意義

目前現有測定牛奶新鮮度的方法有感官檢查、化學檢查和細菌檢查，其中以滴定酸度法和奶滴形狀法最為常見。在滴定酸度法中，牛奶酸度在18°T以內為新鮮牛奶，酸度大于20°T為不新鮮牛奶；而以奶滴形狀進行初步判斷時，奶滴呈球狀為新鮮奶，奶滴流散為不新鮮奶。但這些方法只能較粗略的判定奶的新鮮度，不能準確、客觀地讓消費者知情生鮮乳的新鮮度。

發明內容

針對現有技術在生鮮乳新鮮度判定上存在的問題，本發明提供了一種精準測定生鮮乳新鮮度的方法。

為了解決上述技術問題，本發明采用以下技術方案：

一種生鮮乳新鮮度檢測的方法，包括以下步驟：

(1)、將采集的牛奶在干凈的環境中分裝于無菌管中，分成若干份，在4℃冰箱中按照時間梯度增加分別保存，然后將不同時間梯度的牛奶樣品進行冷凍儲存；

(2)、牛奶樣品在室溫下解凍后經離心機離心，除去脂肪層后收集清液，清液與冰浴的甲醇以1:2-3體積混合，渦旋混合均勻，超聲10-30s后再靜置20s，共10個循環，冰浴靜置5-20min后離心收集上清液，上清液用旋轉蒸發儀將甲醇除去，再用冷凍干燥儀冷凍干燥得到粉末樣品；

(3)、將粉末樣品溶于600μL-1mL磷酸鹽緩沖液，渦旋混勻后離心，取上清液至核磁管中，用核磁共振光譜儀檢測各個樣品的小分子代謝物；

(4)、多元變量統計分析小分子代謝物隨時間的變化，尋找出差異代謝物，然后繪制差異代謝物與保存時間之間的關系，其中，差異代謝物為隨著保存時間的變化而變化的小分子代謝物；

(5)、將待檢測牛奶按照步驟(1)-(3)處理后，測出差異代謝物的值，然后根據關系曲線計算代謝物的相對變化量，以此來對牛奶新鮮度進行評判。

優選地，所述步驟(2)中解凍后離心處理條件為2500-4000×g離心15-40min；冰浴靜置后離心處理條件為10000-15000×g離心10-30min；所述步驟(3)渦旋混勻后離心處理條件為12000-15000×g離心10-30min，所述步驟(2)和步驟(3)離心均在4-6℃環境下操作。

優選地，所述步驟(3)中磷酸鹽緩沖液由0.1M NaH₂PO₄/K₂HPO₄、0.1％NaN₃和100％D₂O組成，其PH為7.4。

優選地，步驟(4)中差異代謝物為乳清酸或三甲胺。

優選地，當牛奶中體細胞數為20萬以下時，乳清酸代謝物的含量隨著時間的增加而顯著下降，差異代謝物選擇乳清酸；當牛奶中體細胞數為100萬以上時，三甲胺代謝物的含量隨著時間的增加而顯著增加，差異代謝物選擇三甲胺。

本發明的有益效果在于：本發明的牛奶生鮮乳新鮮度檢測方法與現有生鮮乳新鮮度檢測技術相比，本發明能夠精準的對生鮮乳新鮮度進行測定，操作易于標準化，結果準確可靠，可為消費者精準的了解乳制品新鮮度提供知情權，對提升消費者對國產奶制品信心起到一定的作用。

具體實施方式

為了便于本領域技術人員理解，下面對本發明作進一步的說明。

實施例1

一種生鮮乳新鮮度檢測的方法，具體步驟如下：

(1)、試驗樣品采集