[發明專利]一種清熱解毒涼血通淋藥物的質量檢測方法

在審

• 申請號: 201610778842.9
• 申請日: 2016-08-31
• 公開（公告）號: CN107782817A
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發明（設計）人: 韓志峰;閆曉楠;張紅茹;潘勤
• 申請（專利權）人: 天津中新藥業研究中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 天津欣達睿誠知識產權代理事務所(普通合伙)12216
• 代理人: 李欣

技術領域

本發明涉及一種清熱解毒涼血通淋藥物的質量檢測方法，特別是涉及一種利用高效液相色譜法測定中藥制劑中灰氈毛忍冬皂苷乙的測定方法，屬于制藥領域。

背景技術

癃清片是目前市場上銷售的一種清熱解毒，涼血通淋的中藥。用于下焦濕熱所致的熱淋，癥見尿頻、尿急、尿痛、腰痛、小腹墜脹。臨床藥效學實驗研究證明，癃清片適宜于治療老年人泌尿系統感染，有明顯的抗炎、鎮痛作用，用于治療泌尿系統感染的有效中成藥。

本發明治療尿路感染及前列腺炎的藥物(癃清片)具有明確地抑菌、抗炎、鎮痛、利尿、改善微循環、增強機體免疫的作用。其組方中金銀花、黃柏、黃連、敗醬草、白花蛇舌草清熱解毒；赤芍、丹皮、仙鶴草散瘀涼血；澤瀉、車前子利水通淋。

《中華人民共和國藥典》2015年版一部公開癃清片的處方和制法為：以上十味，澤瀉粉碎成細粉，過篩，備用；白花蛇舌草、仙鶴草、金銀花、敗醬草加水煎煮二次，每次1小時，濾過，合并濾液，濾液濃縮成相對密度為1.25～1.30(50℃)的清膏；其余車前子等五味用60％乙醇加熱回流三次，第一次3小時，第二次2小時，第三次1小時，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮成相對密度為1.25～1.30(50℃)的清膏。與上述清膏合并，加入澤瀉細粉及輔料適量，混勻，制粒，干燥，壓制成1000片，或包薄膜衣，即得。每片0.6g。

《中華人民共和國藥典》2015年版一部“癃清片”品種項下的檢測指標包括：鑒別項下包括澤瀉顯微鑒別，鹽酸小檗堿、丹皮酚、芍藥苷薄層色譜鑒別；含量測定項下包括鹽酸小檗堿的液相色譜測定。

《中華人民共和國藥典》2015年版一部增補版“癃清膠囊”品種項下的檢測指標包括：鑒別項下包括澤瀉顯微鑒別，黃連、黃柏、鹽酸小檗堿、丹皮酚、芍藥苷、金銀花、綠原酸薄層色譜鑒別；含量測定項下包括鹽酸小檗堿、鹽酸黃柏堿的液相色譜測定。

據文獻記載[張曉靜,劉德福,丁菲菲,田華,鄧雁如,郭利平.HPLC法測定癃清片中表小檗堿、黃連堿、鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿和丹皮酚[J].現代藥物與臨床,2015,05:527-530.]，采用HPLC法同時測定癃清片中表小檗堿、黃連堿、鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿、丹皮酚6種成分。

上述各檢測方法中，并未涉及到制劑中金銀花與山銀花的鑒別。由于山銀花與金銀花均含有綠原酸，且山銀花較金銀花價格低很多，因此有必要對制劑中的金銀花與山銀花進行鑒別，而上述檢測方法均未能顯著區分這兩種藥材。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種檢測癃清片制劑中山銀花的高效液相檢測方法。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種癃清片中山銀花的檢測方法，步驟如下：

(1)對照品溶液的制備：取灰氈毛忍冬皂苷乙對照品適量，精密稱定，加濃度為10％～100％有機溶劑制成每1ml含灰氈毛忍冬皂苷乙0.1～0.5mg的溶液，即得；

(2)供試品溶液的制備：取癃清片樣品20片，精密稱定，研細，取粉末適量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入10％～100％有機溶劑25～50ml，稱定重量，超聲或者回流處理20～60分鐘，放冷，再稱定重量，用10％～100％有機溶劑補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

(3)高效液相色譜法測定：Diamonsil色譜柱；流動相∶乙腈與0.3～0.5％醋酸；流速：0.5ml/min～1.0ml/min；柱溫20℃～40℃；采用蒸發光散射檢測器，分別精密取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入所述高效液相色譜儀，測定。

所述步驟(1)中有機溶劑為甲醇、乙醇或乙腈。

所述步驟(2)中有機溶劑為甲醇、乙醇或乙腈。

優選的，所述步驟(1)和步驟(2)中的有機溶劑為甲醇。

所述步驟(3)Diamonsil色譜柱為C18反相色譜柱，規格：5μm，250×4.6mm。

所述步驟(3)中乙腈與0.4％醋酸的體積比為10～90∶90～10。

優選的，所述步驟(3)中乙腈與0.4％醋酸的體積比為40∶60。

本發明優選的一種癃清片中山銀花的檢測方法，步驟為：

(1)對照品溶液的制備：取灰氈毛忍冬皂苷乙對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含灰氈毛忍冬皂苷乙0.2mg的溶液，即得；