[發明專利]一種清熱解毒涼血通淋藥物的檢測方法

在審

• 申請號: 201610778367.5
• 申請日: 2016-08-31
• 公開（公告）號: CN107782816A
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發明（設計）人: 韓志峰;閆曉楠;張紅茹;潘勤
• 申請（專利權）人: 天津中新藥業研究中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 天津欣達睿誠知識產權代理事務所(普通合伙)12216
• 代理人: 李欣

技術領域

本發明涉及一種清熱解毒涼血通淋藥物的檢測方法，特別是涉及中藥制劑中芍藥苷的檢測方法，屬于制藥領域。

背景技術

癃清片是目前市場上銷售的一種清熱解毒，涼血通淋的中藥。用于下焦濕熱所致的熱淋，癥見尿頻、尿急、尿痛、腰痛、小腹墜脹。臨床藥效學實驗研究證明，癃清片適宜于治療老年人泌尿系統感染，有明顯的抗炎、鎮痛作用，用于治療泌尿系統感染的有效中成藥。

本發明治療尿路感染及前列腺炎的藥物(癃清片)具有明確地抑菌、抗炎、鎮痛、利尿、改善微循環、增強機體免疫的作用。其組方中金銀花、黃柏、黃連、敗醬草、白花蛇舌草清熱解毒；赤芍、丹皮、仙鶴草散瘀涼血；澤瀉、車前子利水通淋。

《中華人民共和國藥典》2015年版一部公開癃清片的處方和制法為：以上十味，澤瀉粉碎成細粉，過篩，備用；白花蛇舌草、仙鶴草、金銀花、敗醬草加水煎煮二次，每次1小時，濾過，合并濾液，濾液濃縮成相對密度為1.25～1.30(50℃)的清膏；其余車前子等五味用60％乙醇加熱回流三次，第一次3小時，第二次2小時，第三次1小時，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮成相對密度為1.25～1.30(50℃)的清膏。與上述清膏合并，加入澤瀉細粉及輔料適量，混勻，制粒，干燥，壓制成1000片，或包薄膜衣，即得。每片0.6g。

《中華人民共和國藥典》2015年版一部“癃清片”品種項下的檢測指標包括：鑒別項下包括澤瀉顯微鑒別，鹽酸小檗堿、丹皮酚、芍藥苷薄層色譜鑒別；含量測定項下包括鹽酸小檗堿的液相色譜測定。

《中華人民共和國藥典》2015年版一部增補版“癃清膠囊”品種項下的檢測指標包括：鑒別項下包括澤瀉顯微鑒別，黃連、黃柏、鹽酸小檗堿、丹皮酚、芍藥苷、金銀花、綠原酸薄層色譜鑒別；含量測定項下包括鹽酸小檗堿、鹽酸黃柏堿的液相色譜測定。

據文獻記載[張曉靜,劉德福,丁菲菲,田華,鄧雁如,郭利平.HPLC法測定癃清片中表小檗堿、黃連堿、鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿和丹皮酚[J].現代藥物與臨床,2015,05:527-530.]，采用HPLC法同時測定癃清片中表小檗堿、黃連堿、鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿、丹皮酚6種成分。

上述各檢測方法中，對于赤芍的檢測，僅為芍藥苷的薄層鑒別，芍藥苷作為赤芍中的主要藥效成分，有必要對其含量進行測定。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種檢測癃清片制劑中芍藥苷的高效液相檢測方法。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種癃清片中芍藥苷的檢測方法，步驟為：

(1)對照品溶液的制備：稱取芍藥苷對照品適量，精密稱定，用有機溶劑配置成為濃度為0.1～1.0mg/ml，搖勻，即得；

(2)供試品溶液的制備：取癃清片樣品20片，精密稱定，研細，取粉末1.0～2.0g精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加10％～100％甲醇25ml～50ml，精密稱定，水浴加熱回流或超聲20～90分鐘，放冷至室溫，精密稱定，用10％～100％有機溶劑補足減失重量，微孔濾膜濾過，作為供試品溶液；

(3)高效液相色譜法測定：色譜條件為：Diamonsil色譜柱；流動相為乙腈與0.1～0.5％磷酸溶液，二者的體積比為10～90∶90～10；檢測波長：232nm；流速：0.5ml/min～1.0ml/min；柱溫20℃～40℃，分別精密取對照品溶液與供試品溶液各5-20ul，注入所述高效液相色譜儀，測定。

所述步驟(1)中的有機溶劑為甲醇、乙醇或乙腈。

所述步驟(2)中的有機溶劑為甲醇、乙醇或乙腈。

優選的，所述步驟(1)或(2)中的有機溶劑為甲醇。

所述步驟(2)的微孔濾膜的孔徑為0.45μm。

所述步驟(3)中流動相，乙腈與0.1～0.5％磷酸溶液的體積比20∶80。

所述步驟(3)中Diamonsil色譜柱為C18反相色譜柱，規格：5μm，250×4.6mm。

本發明優選的一種癃清片中芍藥苷的檢測方法，所述步驟為：

(1)對照品溶液的制備:取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成0.1mg/ml，作為對照品溶液；

(2)供試品溶液的制備:取癃清片樣品20片，精密稱定，研細，取粉末2.0g精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加30％甲醇25ml，精密稱定，水浴加熱回流30分鐘，放冷至室溫，精密稱定，用30％甲醇補足減失重量，選0.45μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液；