[發明專利]一種PLA2R?THSD7A融合蛋白及其應用和試劑盒有效
| 申請號: | 201610770500.2 | 申請日: | 2016-08-30 |
| 公開(公告)號: | CN106432508B | 公開(公告)日: | 2017-12-05 |
| 發明(設計)人: | 熊祖應;王洪濤;林俊;劉堯;張永頂;張大準;張巧;馬偉民 | 申請(專利權)人: | 深圳市伯勞特生物制品有限公司 |
| 主分類號: | C07K19/00 | 分類號: | C07K19/00;G01N33/68;G01N33/564 |
| 代理公司: | 深圳市深佳知識產權代理事務所(普通合伙)44285 | 代理人: | 王仲凱 |
| 地址: | 518000 廣東省深圳市南山*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 pla2r thsd7a 融合 蛋白 及其 應用 試劑盒 | ||
1.一種融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白包括與磷脂酶A2受體PLA2R至少85%序列同源的第一區和與1型血小板反應蛋白7A域THSD7A至少85%序列同源的第二區;所述融合蛋白的制備方法包括:
(1)提取獲得人組織的總RNA;
(2)利用通用引物制備cDNA;
(3)設計PCR引物擴增PLA2R和THSD7A的全長片段;
(4)連接PLA2R和THSD7A的全長片段,獲得重組基因;所述的重組基因為PLA2R-THSD7A序列或THSD7A-PLA2R序列;
(5)將重組基因轉入表達載體,表達獲得PLA2R-THSD7A融合蛋白或THSD7A-PLA2R融合蛋白;
用于構建PLA2R-THSD7A蛋白的引物見表1:
表1 用于構建PLA2R-THSD7A蛋白的引物
用于構建THSD7A-PLA2R蛋白的引物見表2:
表2 用于構建THSD7A-PLA2R蛋白的引物
2.如權利要求1所述融合蛋白在制備自發性膜性腎病診斷試劑中的應用。
3.一種自發性膜性腎病診斷試劑盒,其特征在于,包括如權利要求1所述融合蛋白。
4.根據權利要求3所述的自發性膜性腎病診斷試劑盒,其特征在于,還包括固相支持物和經過標記物標記的第二抗體。
5.根據權利要求4所述的自發性膜性腎病診斷試劑盒,其特征在于,所述固相支持物為生物載片、多孔平板、測試條、乳膠珠子或微球體。
6.根據權利要求4所述的自發性膜性腎病診斷試劑盒,其特征在于,所述標記物為生物酶、具有熒光化合物或金屬的標記物或者具有化學發光化合物的標記物。
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