[發(fā)明專利]利用糖基轉(zhuǎn)移酶的糖類化合物衍生物的制造方法

在審

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• 申請日: 2016-08-31
• 公開（公告）號: CN106755211A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 金基洙;金榮熙;盧勇;金庚泰;樸智浩;陳秀玉
• 申請（專利權(quán)）人: 百朗德生物化學(海門)有限公司
• 主分類號: C12P19/44
• 分類號: C12P19/44;C12P19/18
• 代理公司: 南京正聯(lián)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司32243
• 代理人: 盧海洋

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種利用糖基轉(zhuǎn)移酶的糖類化合物衍生物的制造方法。

本發(fā)明還涉及由此方法而制得的衍生物。

背景技術(shù)

氨基酚類一般是制造糖類化合物衍生物的重要中間產(chǎn)物，同時也在制造染料及其他藥物的中間化學體時使用。此外，4-氨基苯酚在代謝過程中的容易氧化成細胞毒性物質(zhì)，會引起腎臟鄰近血管的多種疾病。(Lock etc., Studies on the mechanism of 4-aminophenol-induced toxicity to renal proximal tubules. Hum. Exp.Toxicol. 12(5), 383-388, 1993.)

現(xiàn)有技術(shù)中已對4-氨基苯酚衍生物的有機合成方法進行了一定的研究。例如，4-[2-(5-甲基)]-氨基噻唑-2，3-D-tert-丁基酚（日本專利，專利號：67023/1987）和3-甲基-4-羥基-5-n-丙烯-7-氟苯并呋喃（日本專利，專利號：53980/1987）是以2-乙氧甲酰或者2-甲酸芐酯作為誘導前體合成的。而且，上述兩種化合物是制備治療哮喘等過敏性疾病藥物的有效成分。同時，2，6-二氯-4-氨基苯酚衍生物和2，6-二氯-4-（3，4，5-三甲氧基苯甲酰）氨基苯酚衍生物被認為是具有免疫活性的優(yōu)良物質(zhì)，并且能有效抵抗PCA（過敏反應(yīng)）（日本專利 專利號：271268/1986）。另外，4-（十二烷基氨基苯酚）-2-乙二醇-6-tert-丁基酚，4-（十八烷基氨基苯酚）-2，6-D-tert-丁基酚被認為是具有良好的防止酸化的活性，同時也是有顯著效果的穩(wěn)定劑（日本專利 專利號：24782/1971）。

氨基酚類物質(zhì)在食品、化妝品、醫(yī)藥品行業(yè)中有廣泛的應(yīng)用，然而這類物質(zhì)往往具有水溶解性低，易被光或熱分解或氧化生成有毒化合物質(zhì)等缺點。因此，為了提高這類化合物的功能性，改善并增強其穩(wěn)定性成為研究的熱點。

此外，已知對苯二酚和熊果苷具有良好的美白效果，通過抑制細胞內(nèi)酪氨酸酶的活性來抑制黑色素的生成，因而可改善雀斑和皮膚老化等問題。然而，這類活性物質(zhì)對細胞的功能性存在一定損傷，會產(chǎn)生副作用。因此，本發(fā)明的目的是尋求新的合成方法制備酪氨酸酶抑制劑對苯二酚和熊果苷的衍生物，使其在細胞內(nèi)能夠穩(wěn)定地發(fā)揮作用而避免副作用的產(chǎn)生。嘗試的方法包括化學方法（Wang etc. A new synthesis of α-arbutin via Lewis acid catalyzed selective glycosylation of tetra-O-benzyl-α-D-glucopyranosyl trichloroacetimidate with hydroquinone, 341, 1945-1947, 2006）和酶合成方法（Sugimoto etc. Enzymatic Synthesis of α-arbutin by α-anomer-selective glucosylation of hydroquinone using lyophilized cells of xanthomonas campestris WU-9701, 93, 328-330, 2002; Sugimoto etc. Synthesis of α-arbutin-α-glycosides and their inhibitory effects on human tyrosinase, 99, 272-276, 2005）。但是，由于制備合成α-1~4結(jié)構(gòu)物質(zhì)的淀粉酶價格過于昂貴。

因此，需要提供一種新的技術(shù)方案來解決上述問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種利用糖基轉(zhuǎn)移酶的糖類化合物衍生物的制造方法。

本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供一種由此方法而制得的衍生物。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的利用糖基轉(zhuǎn)移酶的糖類化合物衍生物的制造方法，包括以下步驟：在含糖濃度為0.1-1M的溶液中添加糖基轉(zhuǎn)移酶，使反應(yīng)釜的最終活性濃度達到0.1-3.0 U/mL后，然后在15-50℃的反應(yīng)釜里添加由2-氨基酸，3-氨基酸，4-氨基酸，對苯二酚及熊果苷構(gòu)成的組中所選擇的至少一種的糖基受體，使最終活性濃度達到質(zhì)量百分含量0.01-3%并使其反應(yīng)，反應(yīng)是在28-37℃下經(jīng)過1-18小時而形成的，糖的葡萄糖或果糖基轉(zhuǎn)移到上述的受體中最后經(jīng)醋酸酸化可得到糖類化合物衍生物。注意，上述反應(yīng)中糖會在15-50℃的條件下進行分解，而處于28-37℃的條件下時，在1-18小時內(nèi)是不完全分解的。