[發明專利]一種含有自體CIK細胞的共培養上清液及其應用

在審

• 申請號: 201610767493.0
• 申請日: 2016-08-30
• 公開（公告）號: CN107779435A
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發明（設計）人: 何躍;麥志國;肖秀麗;袁靜娜;何炳坤;李維維;李結珍;來從顯
• 申請（專利權）人: 廣州市金航生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙)11411
• 代理人: 張清彥

1.一種含有自體CIK細胞的共培養上清液，其特征在于，所述含有自體CIK細胞的共培養上清液主要由以下方法制備得到，所述方法包括：(1)自體CIK細胞培養至第十四天，自體CIK細胞濃度達到1-5×10⁶個/ml，離心，分別得上清液1和底層細胞1；(2)所述底層細胞1加生理鹽水洗滌離心，得底層細胞2；(3)將步驟(1)所得的上清液1再經過離心，棄底層絮狀沉淀，得上清液2；(4)向步驟(3)所述上清液2和步驟(2)所述底層細胞2混合，加入生理鹽水，人血白蛋白，硫酸慶大霉素，制成細胞混懸液，即得所述含有自體CIK細胞的共培養上清液。

2.根據權利要求1所述的一種含有自體CIK細胞的共培養上清液，其特征在于，所述方法還包括(1)包被抗人CD3單克隆抗體的培養瓶的預處理；(2)外周血單個核細胞的分離提取與初培養；(3)自體CIK細胞的擴增培養。

3.根據權利要求2所述的一種含有自體CIK細胞的共培養上清液，其特征在于，步驟(3)自體CIK細胞的擴增培養采用含有IL-2 1000U/ml，20％滅活血漿的RPMI-1640。

4.一種根據權利要求1-3任意一項所述的含有自體CIK細胞的共培養上清液在制備抗腫瘤治療藥物中的應用。