[發(fā)明專利]一種含有自體CIK細(xì)胞的共培養(yǎng)上清液及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610767493.0
• 申請(qǐng)日: 2016-08-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107779435A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-03-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何躍;麥志國(guó);肖秀麗;袁靜娜;何炳坤;李維維;李結(jié)珍;來(lái)從顯
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州市金航生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N5/0783
• 分類號(hào): C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11411
• 代理人: 張清彥

1.一種含有自體CIK細(xì)胞的共培養(yǎng)上清液，其特征在于，所述含有自體CIK細(xì)胞的共培養(yǎng)上清液主要由以下方法制備得到，所述方法包括：(1)自體CIK細(xì)胞培養(yǎng)至第十四天，自體CIK細(xì)胞濃度達(dá)到1-5×10⁶個(gè)/ml，離心，分別得上清液1和底層細(xì)胞1；(2)所述底層細(xì)胞1加生理鹽水洗滌離心，得底層細(xì)胞2；(3)將步驟(1)所得的上清液1再經(jīng)過(guò)離心，棄底層絮狀沉淀，得上清液2；(4)向步驟(3)所述上清液2和步驟(2)所述底層細(xì)胞2混合，加入生理鹽水，人血白蛋白，硫酸慶大霉素，制成細(xì)胞混懸液，即得所述含有自體CIK細(xì)胞的共培養(yǎng)上清液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有自體CIK細(xì)胞的共培養(yǎng)上清液，其特征在于，所述方法還包括(1)包被抗人CD3單克隆抗體的培養(yǎng)瓶的預(yù)處理；(2)外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離提取與初培養(yǎng)；(3)自體CIK細(xì)胞的擴(kuò)增培養(yǎng)。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種含有自體CIK細(xì)胞的共培養(yǎng)上清液，其特征在于，步驟(3)自體CIK細(xì)胞的擴(kuò)增培養(yǎng)采用含有IL-2 1000U/ml，20％滅活血漿的RPMI-1640。

4.一種根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的含有自體CIK細(xì)胞的共培養(yǎng)上清液在制備抗腫瘤治療藥物中的應(yīng)用。