[發(fā)明專利]一種提高苦瓜離體胚挽救成苗的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610753075.6
• 申請(qǐng)日: 2016-08-29
• 公開（公告）號(hào): CN106359089B
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳小鳳;黃如葵;梁家作;馮誠(chéng)誠(chéng);劉杏連;黃熊娟;黃玉輝;陳振東;秦健;宋煥忠;陳明周
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00;A01H1/02
• 代理公司: 北京中譽(yù)威圣知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11279
• 代理人: 朱志寬

1.一種提高苦瓜離體胚挽救成苗的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)授粉：為苦瓜遠(yuǎn)緣雜交授粉或輻射花粉授粉；所述的苦瓜材料為MC6、MC8、MC9、MC39、MC72或MC143；輻射采用C060y射線輻射，輻射劑量為150GY；

(2)胚挽救時(shí)期：取授粉后第5～10d的果實(shí)；

(3)種子培養(yǎng)前處理：在無菌條件下，剖開果實(shí)取出種子，將種子置于MS培養(yǎng)基中，并于暗培養(yǎng)條件下培養(yǎng)10～15d；

(4)接種方式：前處理結(jié)束后，切掉大部分種子，保留1/4含胚部分，放入MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)，經(jīng)7～20d光培養(yǎng)后，挑出綠胚并繼續(xù)放MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)，直至胚萌發(fā)成苗；

(5)增殖培養(yǎng)：將含有子葉、真葉的苗，切掉頂芽并置于MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，待子葉的腋芽長(zhǎng)出后，切下腋芽繼續(xù)置于MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)；

(6)生根培養(yǎng)：將未生根的苗置于生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行生根誘導(dǎo)，將已生根的苗直接進(jìn)行移栽前處理；

(7)移栽前處理：將已生根的苗煉苗5～7d后，取出生根苗，洗凈培養(yǎng)基，栽入基質(zhì)中，蓋膜保溫保濕，溫度25～30℃，濕度90～95％；

(8)移栽：掀開膜后保持基質(zhì)濕潤(rùn)，噴1次營(yíng)養(yǎng)液，以葉面不滴水珠為止，待根系發(fā)育成側(cè)根發(fā)達(dá)的根團(tuán)時(shí)，即可移栽定植。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高苦瓜離體胚挽救成苗的方法，其特征在于，步驟(1)中所述的遠(yuǎn)緣雜交授粉為：把次日要開放的待改良的雌花套袋隔離，次日早上8～10時(shí)，采集當(dāng)日開放、抗性好資源的雄花給套袋的雌花授粉，授粉后繼續(xù)套袋隔離至座果，獲得膨大果實(shí)。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提高苦瓜離體胚挽救成苗的方法，其特征在于，所述抗性好的資源指葫蘆科中與苦瓜不同屬的資源或苦瓜屬中不同種的資源。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高苦瓜離體胚挽救成苗的方法，其特征在于，步驟(1)中所述的輻射花粉授粉為：于早上8～10時(shí)采集次日開放的雄花，裝入防水袋中，即進(jìn)行C060y射線輻射，輻射劑量為150GY；并于取雄花當(dāng)天下午把要授粉的雌花套袋，用輻照過的花粉授粉并作好標(biāo)記，繼續(xù)套袋隔離至座果，獲得膨大果實(shí)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高苦瓜離體胚挽救成苗的方法，其特征在于，步驟(3)中暗培養(yǎng)條件為溫度24～28℃，光照時(shí)間0h/d。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高苦瓜離體胚挽救成苗的方法，其特征在于，步驟(4)中光培養(yǎng)條件為溫度24～28℃，光強(qiáng)2000Lux，光照時(shí)間8h/d。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高苦瓜離體胚挽救成苗的方法，其特征在于，步驟(6)中所述的生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.05mg/L。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高苦瓜離體胚挽救成苗的方法，其特征在于，步驟(7)中的基質(zhì)是由蛭石和苦瓜專用基質(zhì)按照體積比為1：1組成。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高苦瓜離體胚挽救成苗的方法，其特征在于，步驟(8)中的營(yíng)養(yǎng)液為大量元素減半的MS培養(yǎng)基。