[發(fā)明專利]高效液相色譜法分析分離托吡司他及其雜質(zhì)的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610719984.8
• 申請日: 2016-08-25
• 公開（公告）號: CN107782800A
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 嚴潔
• 申請（專利權(quán)）人: 天津漢瑞藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及托吡司他中間體雜質(zhì)分離與分析方法，尤其是一種高效液相色譜法。

背景技術(shù)

托吡司他，化學(xué)名4-[5-(吡啶-4-基)-1H-[1,2,4]三唑-3-基]吡啶-2-甲腈，英文名： Topiroxostat，商品名：TOPILORIC，是一種非嘌呤類黃嘌呤氧化還原酶選擇性抑制劑，用于治療痛風(fēng)、高尿酸血癥。由日本富士藥品株式會社及三和化學(xué)研究所共同研發(fā)，2012年6月 向日本厚生勞動省提交上市申請，2013年6月28日，托吡司他片獲得批準。

中國申請的專利CN1561340，最早公開了托吡司他的合成路線，對于合成托吡司他的過程中引入的中間體雜質(zhì)，不論是在原料藥還是制劑中都是需要進行嚴格控制的，托吡司他中間體中的光學(xué)雜質(zhì)去除不完全，將會引入到原料藥終產(chǎn)品中，從而影響藥物純度和質(zhì)量，所以發(fā)現(xiàn)一種托吡司他中間體光學(xué)異構(gòu)體分析分離的方法具有現(xiàn)實意義。

申請人發(fā)現(xiàn)，用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱(C18(250×4.6mm，5μm))，采用0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH 值至3.0)-甲醇＝50∶10為流動相，可以將托吡司他及其雜質(zhì)快速有效的分離，很好的控制托吡司他及其制劑的質(zhì)量。本發(fā)明的方法能簡單、快速、準確地分析托吡司他的純度和含量并能有效的控制中間體雜質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種快速分析分離托吡司他中間體雜質(zhì)的高效液相色譜法，從而實現(xiàn)了托吡司他中間體雜質(zhì)的分離測定。

本發(fā)明所說的用高效液相色譜法分離與分析托吡司他中間體異構(gòu)體雜質(zhì)的方法，是選擇以氨基鍵合硅膠或烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱，以一定比例的有機相-緩沖液為流動相。

上述所說的以氨基鍵合硅膠或烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱，優(yōu)選十八烷基硅烷鍵合硅膠的色譜柱。

本發(fā)明的流動相中的有機相選自甲醇、乙腈、四氫呋喃，優(yōu)選甲醇。

本發(fā)明的流動相，有機相-緩沖液的的比例為10∶85～35∶65，優(yōu)選10∶50。

本發(fā)明的流動相中所選用的緩沖液選自磷酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液，優(yōu)選磷酸鹽緩沖液，最優(yōu)選磷酸二氫鉀緩沖液，緩沖液的濃度范圍為0.01mol/L～0.05mol/L，優(yōu)選0.01mol/L。

本發(fā)明所述的分析分離方法，可以依照以下方法實現(xiàn)：

(1)取待處理樣品適量，用甲醇溶解，配制成每1ml中含0.1mg的樣品溶液。

(2)設(shè)置流動相流速為1.0mL/min，檢測波長為210nm，色譜柱溫度為室溫。

(3)取(1)的混合樣品溶液20μl注入液相色譜儀，完成托吡司他中間體雜質(zhì)的分離與分析。

本發(fā)明通過選擇適當(dāng)?shù)墓潭ㄏ嗪土鲃酉啵约斑m當(dāng)?shù)臏y定條件，為準確的完成托吡司他的分析分離提供一種可靠的方法。

附圖說明

圖1：按照實施例1條件分離的托吡司他中間體雜質(zhì)HPLC圖

具體實施方式：

實施例1

儀器：SHIMADZU LC-10AT高效液相色譜儀，SPD-10Avp紫外檢測器；

色譜柱：C18(250×4.6mm，5μm)；

流動相：0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇＝10∶50

流速：1.0mL/min

檢測波長：210nm

柱溫：室溫

進樣體積：20μl

試驗步驟

稱取托吡司他與中間體雜質(zhì)各10mg，同置于10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml置50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為混合樣品溶液；另分別稱取托吡司他及中間體雜質(zhì)，分別置于10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取 5ml置50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為定性對照溶液。

分別取各對照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進行高效液相色譜分析，記錄色譜圖。結(jié)果見圖1。圖1中保留時間為10.761min的色譜峰為托吡司他，其余色譜峰為托吡司他各有關(guān)物質(zhì)的色譜峰，由圖可以看出托吡司他與有關(guān)物質(zhì)能夠達到基線分離，符合中國藥典的要求。