[發(fā)明專利]一種零背景的平末端克隆載體pUB857及其構(gòu)建方法和應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610709625.4 | 申請日： | 2016-08-23 |
| 公開（公告）號： | CN107760703A | 公開（公告）日： | 2018-03-06 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 汪洋;張開;易軍;蘇會娟 | 申請（專利權(quán)）人： | 南京理工大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/63 | 分類號： | C12N15/63;C12N15/66 |
| 代理公司： | 南京理工大學(xué)專利中心32203 | 代理人： | 劉海霞,朱顯國 |
| 地址： | 210094 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 背景 末端 克隆 載體 pub857 及其 構(gòu)建 方法 應(yīng)用 | ||
【權(quán)利要求書】：
1.一種零背景的平末端克隆載體pUB857，其特征在于，為利用PvuII酶切pUC19質(zhì)粒形成線性DNA鏈，同時在酶切位點連接ccdB和cI857-PR形成的全長序列為SEQ IDNO.9的克隆載體，所述的ccdB開放閱讀框上設(shè)計有SmaI酶切位點。
2.如權(quán)利要求1所述的零背景的平末端克隆載體pUB857的構(gòu)建方法，其特征在于，通過合成引物PCR擴(kuò)增cI857-PR目的片段和ccdB目的片段，并將pUC19質(zhì)粒DNA用限制性內(nèi)切酶PvuII進(jìn)行酶切，回收線性化片段pUC19，最后將ccdB、cI857-PR、線性化pUC19片段進(jìn)行連接，得到克隆載體pUB857。
3.如權(quán)利要求1所述的零背景的平末端克隆載體pUB857在基因克隆中的應(yīng)用。
4.如權(quán)利要求1所述的零背景的平末端克隆載體pUB857在基因文庫構(gòu)建中的應(yīng)用。
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