[發明專利]一種測定養血清腦水提浸膏中生物堿成分含量的方法

有效

• 申請號: 201610708548.0
• 申請日: 2016-08-23
• 公開（公告）號: CN107764908B
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 徐波;牛濤;陳紅;張學敏
• 申請（專利權）人: 天津天士力現代中藥資源有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為

1.一種測定養血清腦水提浸膏中生物堿成分含量的方法，所述方法，包括以下步驟：供試品溶液的制備、對照品溶液的制備和含量測定，

其中，所述供試品溶液的制備包括以下步驟：取養血清腦水提浸膏約0.2g，精密稱定，35％-45％甲醇10mL超聲溶解，上至已處理好的規格為500mg/6mL的ProElut C₁₈-U柱，用35％-45％甲醇5mL洗滌，洗滌液棄去，用甲醇4.5mL洗脫，收集洗脫液，用甲醇定容至5mL，搖勻，即得，

其中，所述對照品溶液的制備包括以下步驟：以鉤藤堿、異鉤藤堿、去氫鉤藤堿和異去氫鉤藤堿作為對照品，用甲醇配制成每毫升含鉤藤堿、異鉤藤堿、去氫鉤藤堿和異去氫鉤藤堿為0.008-0.012mg、0.01-0.02mg、0.001-0.002mg和0.004-0.006mg的溶液，即得，

其中，所述含量測定，包括以下步驟：分別取對照品溶液和供試品溶液各1-3ul，注入液相色譜儀，記錄峰面積，外標法計算供試品溶液中鉤藤堿、異鉤藤堿、去氫鉤藤堿和異去氫鉤藤堿的含量，

所述含量檢測時液相色譜儀色譜條件如下：色譜柱ACQUITY UPLC CSH C₁₈，規格為2.1×100mm，梯度洗脫，其中流動相為：流動相A為0.02％-0.2％乙酸銨水溶液，流動相B為乙腈；流速：0.35-0.45ml/min；檢測波長：240-250nm，

梯度洗脫程序如下：

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動相的乙酸銨優選為0.02-0.1％。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

步驟1：對照品溶液的制備

精密稱取鉤藤堿、異鉤藤堿、去氫鉤藤堿和異去氫鉤藤堿對照品適量，分別置于容量瓶中，加甲醇溶解，分別制得每毫升含鉤藤堿、異鉤藤堿、去氫鉤藤堿和異去氫鉤藤堿為0.01mg、0.015mg、0.0016mg和0.005mg的溶液，既得；

步驟2：供試品溶液的制備

取養血清腦水提浸膏約0.2g，精密稱定，35％-45％甲醇10mL超聲溶解，上至已處理好的規格為500mg/6mL的ProElut C₁₈-U柱，用35％-45％甲醇5mL洗滌，洗滌液棄去，用甲醇4.5mL洗脫，收集洗脫液，用甲醇定容至5mL，搖勻，即得；

步驟3：含量測定法

分別取對照品溶液和供試品溶液各2ul，注入液相色譜儀，記錄峰面積，外標法計算含量；

所述的液相色譜儀色譜條件如下：

色譜柱ACQUITY UPLC CSH C₁₈規格為2.1×100mm，流動相：流動相A為0.02％-0.2％乙酸銨水溶液，流動相B為乙腈，梯度洗脫程序見下表；流速：0.35-0.45ml/min，檢測波長：240-250nm；

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

步驟1：對照品溶液的制備

精密稱取鉤藤堿、異鉤藤堿、去氫鉤藤堿和異去氫鉤藤堿對照品適量，分別置于容量瓶中，加甲醇溶解，分別制得每毫升含鉤藤堿、異鉤藤堿、去氫鉤藤堿和異去氫鉤藤堿為0.01mg、0.015mg、0.0016mg和0.005mg的溶液，既得；

步驟2：供試品溶液的制備

取養血清腦水提浸膏約0.2g，精密稱定，40％甲醇10mL超聲溶解，上至已處理好的規格為500mg/6mL的ProElut C₁₈-U柱，用40％甲醇5mL洗滌，洗滌液棄去，用甲醇4.5mL洗脫，收集洗脫液，用甲醇定容至5mL，搖勻，即得；

步驟3：含量測定法

分別取對照品溶液和供試品溶液各2ul，注入液相色譜儀，記錄峰面積，外標法計算含量；

所述的液相色譜儀色譜條件如下：

色譜柱ACQUITY UPLC CSH C₁₈規格為2.1×100mm，流動相：流動相A為0.05％乙酸銨水溶液，流動相B為乙腈，梯度洗脫程序見下表；流速：0.35-0.45ml/min，檢測波長：246nm；