[發明專利]一種呫噸聚氨基甲酸乙酯半抗原、人工抗原及其應用有效
| 申請號: | 201610675358.3 | 申請日: | 2016-08-16 |
| 公開(公告)號: | CN106317009B | 公開(公告)日: | 2019-03-26 |
| 發明(設計)人: | 徐振林;羅林;孫遠明;楊金易;雷紅濤;王弘;沈玉棟;劉功良 | 申請(專利權)人: | 華南農業大學 |
| 主分類號: | C07D311/86 | 分類號: | C07D311/86;C07D311/88;C07K14/765;C07K16/44;C07K16/06;G01N33/52 |
| 代理公司: | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人: | 林麗明 |
| 地址: | 510642 廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 聚氨基甲酸乙酯 人工抗原 半抗原 氨基甲酸乙酯 抗體 免疫檢測技術 免疫實驗動物 特異性識別 醇衍生物 間接檢測 載體蛋白 偶聯 應用 | ||
1.一種呫噸聚氨基甲酸乙酯半抗原,其特征在于,其結構式如式(I)所示:
式(I);
其中,n=0~6。
2.一種呫噸聚氨基甲酸乙酯人工抗原,其特征在于,其結構式如式(Ⅱ)所示:
式(Ⅱ);
其中,n=0~6,載體蛋白為免疫原載體蛋白或包被原載體蛋白,免疫原載體蛋白為牛血清蛋白,包被原載 體蛋白為雞卵清白蛋白。
3.權利要求1所述的呫噸聚氨基甲酸乙酯半抗原的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)將氨基甲酸乙酯與式(Ⅲ)所示帶羧基的呫噸醇衍生物在室溫條件下于含醋酸的甲醇中進行親核取代反應;
(2)蒸干甲醇,用稀鹽酸洗滌得到的沉淀,烘干即得半抗原;
式(Ⅲ);
其中n=0~6。
4.根據權利要求3所述的呫噸聚氨基甲酸乙酯半抗原的制備方法,其特征在于:步驟(1)所述帶羧基的呫噸醇衍生物為9-羥基-9H-呫噸-3-羧酸或2-(9-羥基-9H-呫噸-4-基)乙酸。
5.權利要求2所述的呫噸聚氨基甲酸乙酯人工抗原的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)將權利要求1中的呫噸聚氨基甲酸乙酯半抗原與N,N’-二環己基碳二亞胺和N-羥基硫代琥珀酰亞胺反應形成活潑酯;
(2)將活潑酯滴加入載體蛋白溶液中,反應過夜;
(3)偶聯有氨基甲酸乙酯呫噸醇衍生物半抗原的蛋白經過3天的透析純化得到人工抗原。
6.一種呫噸聚氨基甲酸乙酯抗體的制備方法,其特征在于,用權利要求2所述的人工抗原免疫實驗動物,使其機體產生特異地針對呫噸聚氨基甲酸乙酯的抗體。
7.根據權利要求6所述的制備方法,其特征在于,呫噸聚氨基甲酸乙酯抗體的制備方法包括如下步驟:
(1)將權利要求2所述的呫噸聚氨基甲酸乙酯人工抗原配合福式佐劑免疫實驗動物;
(2)免疫4次后抽取血液,分離血清;
(3)血清經過抗體純化得到目標抗體。
8.權利要求2所述的呫噸聚氨基甲酸乙酯人工抗原在間接檢測聚氨基甲酸乙酯中的應用。
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