[發(fā)明專利]一種高純度羅漢果苷V的分離純化方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610643958.1
• 申請(qǐng)日: 2016-08-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106279339B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 龍偉岸;黃華學(xué)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南華誠(chéng)生物資源股份有限公司
• 主分類號(hào): C07J17/00
• 分類號(hào): C07J17/00
• 代理公司: 長(zhǎng)沙星耀專利事務(wù)所(普通合伙) 43205
• 代理人: 陳亞琴;寧星耀

一種高純度羅漢果苷V的分離純化方法，包括以下步驟：（1）溶解、離心：取羅漢果粗制品，加水進(jìn)行溶解，離心，得離心液；（2）超濾、納濾、濃縮：將離心液進(jìn)行超濾，納濾，真空濃縮，得濃縮液；（3）硅膠拌樣、洗脫、濃縮：將濃縮液與硅膠混合拌樣，干燥，裝入硅膠層析柱，洗脫，分段收集目標(biāo)餾分，濃縮，干燥，得羅漢果苷V干粉；（4）結(jié)晶、洗滌、干燥：將羅漢果苷V干粉溶解，過(guò)濾，結(jié)晶，晶體洗滌、干燥，得高純度羅漢果苷V產(chǎn)品。按照本發(fā)明方法所得高純度羅漢果苷V產(chǎn)品的純度≥98.4%，最終收率＞90%；本發(fā)明方法打破現(xiàn)有技術(shù)的局限，簡(jiǎn)化工藝流程，操作性強(qiáng)，安全環(huán)保，且成本低，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高純度羅漢果苷V的分離純化方法，具體涉及一種以羅漢果粗制品為原料，制得高純度羅漢果苷V的分離純化方法。

背景技術(shù)

羅漢果味甘性涼，歸肺、大腸經(jīng)，有潤(rùn)肺止咳，生津止渴的功效，適用于肺熱或肺燥咳嗽，百日咳及暑熱傷津口渴等，此外還有潤(rùn)腸通便的功效。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實(shí)，羅漢果含有一種比蔗糖甜300倍的甜味素——羅漢果苷V，熱量?jī)H為蔗糖的五十分之一，是一種十分理想的天然甜味劑，可作為糖尿病、肥胖等不宜吃糖者的理想替代糖源。

羅漢果苷V純度的高低是衡量其甜度和口感的重要指標(biāo)，高純度的羅漢果苷V目前在國(guó)內(nèi)外食品、飲料行業(yè)備受青睞。

雖然羅漢果提取物在國(guó)內(nèi)早已實(shí)現(xiàn)了規(guī)模化生產(chǎn)，但是，現(xiàn)有產(chǎn)品中的羅漢果苷V的純度普遍在60%以下，高純度羅漢果苷V的制備僅停留在理論和實(shí)驗(yàn)室階段，高純度羅漢果苷V的批量生產(chǎn)難以實(shí)現(xiàn)。

CN1706861A公開(kāi)了一種高純度羅漢果甜苷V的制備方法和用途，在純化步驟采用正相硅膠柱層析和反相硅膠C-18柱串聯(lián)分離技術(shù)，正相硅膠柱層析使用的洗脫劑為氯仿和甲醇，反相硅膠C-18柱使用的洗脫劑為丙酮和水。該方法使用正向硅膠和反向硅膠串聯(lián)分離，工藝繁瑣，規(guī)模化難度大、投資高，在技術(shù)效果部分對(duì)羅漢果苷V的收率和純度均無(wú)具體描述；且使用的溶劑都屬于第二類毒性有機(jī)溶劑（無(wú)基因毒性，但有動(dòng)物致癌性的溶劑），在食品藥品行業(yè)不宜使用。

CN 103923152 B公開(kāi)了一種羅漢果甙 V 的提取方法，是以羅漢果鮮果為原料，經(jīng)提取、大孔樹(shù)脂吸附分離、離子交換樹(shù)脂精制、硅膠精制后濃縮再噴霧干燥，獲得終產(chǎn)品羅漢果甙V提取物。該方法采用大孔樹(shù)脂富集羅漢果糖的各種甙元，而采用水相中硅膠吸附雜質(zhì)的方法分離純化，其精制的產(chǎn)品含量最高也只能達(dá)到60%，不能將苷V與其它羅漢果甜苷分離開(kāi)。

CN 101402665 B公開(kāi)了一種羅漢果苷 V 的制備方法，其中，粗苷采用硅膠柱層析和后續(xù)的 C18 反相柱層析，正相硅膠柱層析使用的洗脫劑為二氯甲烷和乙醇，反相硅膠C-18柱使用的洗脫劑為乙腈和水。雖然正相硅膠層析加反相C18柱串聯(lián)的純化效果較為理想，但是，最終轉(zhuǎn)移率很低，只有50%左右，而且操作過(guò)程復(fù)雜，對(duì)餾出物需分成小份，如接收的每一小杯為20mL都要頻繁進(jìn)行 HPLC 檢測(cè)，設(shè)備投資高、規(guī)模小，不利于實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用。

CN 102659739 A公開(kāi)了一種白楊黃素二甲醚的提取方法，屬于植物有效成分提取分離技術(shù)領(lǐng)域，使用硅膠拌樣上硅膠層析柱，但其硅膠拌樣為實(shí)驗(yàn)室常用手法，采用有機(jī)溶劑拌樣，然后揮干再裝柱，存在操作時(shí)間長(zhǎng)、量少、安全隱患，不適合工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)缺陷。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是，克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷，提供一種產(chǎn)品收率、純度高，工藝簡(jiǎn)單，操作性強(qiáng)，安全環(huán)保，成本低，適用于工業(yè)化生產(chǎn)的高純度羅漢果苷V的分離純化方法。

本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案如下：一種高純度羅漢果苷V的分離純化方法，包括以下步驟：

（1）溶解、離心：取羅漢果粗制品，加水進(jìn)行溶解，離心，得離心液；

（2）超濾、納濾、濃縮：將步驟（1）所得離心液進(jìn)行超濾，納濾，真空濃縮，得濃縮液；