[發(fā)明專利]雞傳染性鼻炎亞單位疫苗及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610606316.4 | 申請日： | 2016-07-28 |
| 公開（公告）號： | CN106220716B | 公開（公告）日： | 2017-07-07 |
| 發(fā)明（設計）人： | 王宏俊;李淑芳;陳小玲;張培君;龔玉梅;李桂萍 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京市農(nóng)林科學院 |
| 主分類號： | C07K14/285 | 分類號： | C07K14/285;C12N15/31;A61K39/102;A61P31/04 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11129 | 代理人： | 吳泳歷 |
| 地址： | 100097 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 傳染性 鼻炎 單位 疫苗 及其 制備 方法 | ||
1.一種副雞禽桿菌免疫保護性抗原蛋白，其特征在于，由氨基酸序列如Seq ID No.1～16所示的16個抗原表位或表位域以及連接肽通過序列拼接構(gòu)成，其氨基酸序列如Seq ID No.21所示。
2.編碼權(quán)利要求1所述的副雞禽桿菌免疫保護性抗原蛋白的基因。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基因，其特征在于，其核苷酸序列如Seq ID No.26所示。
4.一種構(gòu)建體，其特征在于，包含權(quán)利要求2或3所述的基因。
5.一種重組細胞，其特征在于，是由權(quán)利要求4所述的構(gòu)建體轉(zhuǎn)化受體細胞而得。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的重組細胞，其特征在于，所述受體細胞選自細菌、酵母、動物細胞和植物細胞。
7.一種雞傳染性鼻炎亞單位疫苗，其特征在于，其免疫活性組分包括權(quán)利要求1所述的副雞禽桿菌免疫保護性抗原蛋白。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的雞傳染性鼻炎亞單位疫苗，其特征在于，所述副雞禽桿菌免疫保護性抗原蛋白的終濃度為5-100μg/ml。
9.一種雞傳染性鼻炎亞單位疫苗的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)構(gòu)建權(quán)利要求1所述的副雞禽桿菌免疫保護性抗原蛋白的表達載體；
(2)用所述表達載體轉(zhuǎn)化與之匹配的蛋白表達系統(tǒng)，得到重組細胞；
(3)培養(yǎng)所述重組細胞，誘導表達獲得副雞禽桿菌免疫保護性抗原蛋白并純化蛋白；
(4)將純化后的副雞禽桿菌免疫保護性抗原蛋白與輔助試劑混合，調(diào)節(jié)所述抗原蛋白的終濃度為5-100μg/ml，得到雞傳染性鼻炎亞單位疫苗。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述表達載體選自pET、pQE和pGEX系列的載體；所述蛋白表達系統(tǒng)選自大腸桿菌BL21、DH5ɑ、Top10和JM109菌株；所述輔助試劑包括免疫增強劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、鹽溶液和/或蒸餾水。
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