[發明專利]重組酶聚合酶擴增試劑盒、擴增方法及擴增試劑在審
| 申請號： | 201610587482.4 | 申請日： | 2016-07-22 |
| 公開（公告）號： | CN107641635A | 公開（公告）日： | 2018-01-30 |
| 發明（設計）人： | 盛司潼;龔敬文 | 申請（專利權）人： | 廣州康昕瑞基因健康科技有限公司 |
| 主分類號： | C12P19/34 | 分類號： | C12P19/34 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 510000 廣東省廣州市蘿*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 重組 聚合 擴增 試劑盒 方法 試劑 | ||
1.一種重組酶聚合酶擴增試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括以下組分：Ecoli RecA蛋白、λ phage Orf蛋白、Ecoli SSB蛋白及DNA聚合酶。
2.根據權利要求1所述的重組酶聚合酶擴增試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括擴增反應緩沖液，所述擴增反應緩沖液包括Tris 緩沖液，所述擴增反應緩沖液還包括聚乙二醇、二硫蘇糖醇、磷酸肌酸和肌酸激酶中的一種或多種。
3.根據權利要求2所述的重組酶聚合酶擴增試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括鎂離子制劑。
4.一種重組酶聚合酶擴增方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
A、配置反應體系，所述反應體系包括：模板核酸分子、引物組、Ecoli RecA蛋白、λ phage Orf蛋白、Ecoli SSB蛋白、DNA聚合酶、dNTP、ATP及擴增反應緩沖液，所述擴增反應緩沖液包括Tris 緩沖液；
B、向所述反應體系中加入鎂離子制劑；
C、在20至65℃條件下進行擴增反應。
5.根據權利要求4所述的重組酶聚合酶擴增方法，其特征在于，所述擴增反應緩沖液還包括聚乙二醇、二硫蘇糖醇、磷酸肌酸和肌酸激酶中的一種或多種。
6.根據權利要求4所述的重組酶聚合酶擴增方法，其特征在于，所述引物組包括一對引物，所述引物的長度為30至65bp。
7.根據權利要求4所述的重組酶聚合酶擴增方法，其特征在于，所述Ecoli RecA蛋白濃度為20至250ng/μL；所述λ phage Orf蛋白濃度為20至80ng/μL；所述Ecoli SSB蛋白濃度為200至1000ng/μL。
8.一種重組酶聚合酶擴增試劑，其特征在于，所述試劑包括：Ecoli RecA蛋白、λ phage Orf蛋白、Ecoli SSB蛋白及DNA聚合酶。
9.根據權利要求8所述的重組酶聚合酶擴增試劑，其特征在于，所述擴增試劑還包括擴增反應緩沖液，所述擴增反應緩沖液包括Tris 緩沖液；所述擴增反應緩沖液還包括聚乙二醇、二硫蘇糖醇、磷酸肌酸和肌酸激酶中的一種或多種。
10.根據權利要求8所述的重組酶聚合酶擴增試劑，其特征在于，所述Ecoli RecA蛋白濃度為20至250ng/μL；所述Ecoli SSB蛋白的濃度為200至1000ng/μL；所述λ phage Orf蛋白濃度為20至80ng/μL。
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