[發明專利]一種南極磷蝦中吡咯并[1,2?a]吡嗪?1,4?二酮,六氫?3?(2?甲基丙基)的提取純化及檢測方法

有效

• 申請號: 201610570448.6
• 申請日: 2016-07-19
• 公開（公告）號: CN106279180B
• 公開（公告）日: 2018-03-23
• 發明（設計）人: 王翩翩;劉代成
• 申請（專利權）人: 山東師范大學
• 主分類號: C07D487/04
• 分類號: C07D487/04;G01N30/02
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司37221
• 代理人: 趙妍

1.一種南極磷蝦中六氫-3-(2-甲基丙基)-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮的提取純化方法，其特征在于，所述提取純化步驟如下：

（1）向南極磷蝦中加入甲醇進行回流提取，過濾，得濾液；濾液蒸發濃縮得甲醇膏；

（2）向步驟（1）的甲醇膏中加入乙醚浸提，過濾得乙醚液；乙醚液蒸發后得乙醚浸膏；

（3）步驟（2）的乙醚浸膏加入適量乙醚溶解后，得乙醚浸膏液，再向其中加入硫酸水溶液攪拌萃取，萃取得酸水層；

（4）向步驟（3）所得酸水層中加入氯仿進行萃取，靜置分液得氯仿層A；

（5）向步驟（4）所得氯仿層A中加入氫氧化鈉水溶液萃取，靜置分液得堿水層和氯仿層B；

（6）將步驟（5）所得堿水層中加入適量NH₄Cl，調節pH至7-8，再加入等體積氯仿進行攪拌萃取，靜置分液得氯仿層C；

（7）氯仿層C蒸發濃縮得六氫-3-(2-甲基丙基)-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮樣品。

2.如權利要求1中所述的一種提取純化方法，其特征在于，所述步驟（1）中，南極磷蝦在加入甲醇前先經過冷凍干燥處理；南極磷蝦與甲醇加入量的比為1g: (6-10)mL，提取溫度為70~85℃；甲醇回流提取的次數為7-9次，每次提取的時間為1-2h。

3.如權利要求2中所述的一種提取純化方法，其特征在于，所述提取溫度為80℃；所述每次提取時間為1h。

4.如權利要求1中所述的一種提取純化方法，其特征在于，所述步驟（2）中，甲醇膏與乙醚加入量的比為1g: (4-6)mL，加入乙醚浸提的次數為4-6次，每次提取的時間為0.5-1h。

5.如權利要求4中所述的一種提取純化方法，其特征在于，每次提取時間為1h。

6.如權利要求1中所述的一種提取純化方法，其特征在于，所述步驟（3）中，乙醚浸膏與乙醚加入量的比為1g:10mL；

所述乙醚浸膏液與硫酸水溶液加入量的體積比為1: (10-30)；所述硫酸水溶液的體積分數為1~3%。

7.如權利要求6所述的一種提取純化方法，其特征在于，所述硫酸水溶液的體積分數為2%。

8.如權利要求1中所述的一種提取純化方法，其特征在于，所述步驟（4）中，酸水層與氯仿體積比為1:1；所述氯仿與酸水層攪拌萃取次數為3-4次，每次攪拌萃取時間為0.5~1.5h。

9.如權利要求8中所述的一種提取純化方法，其特征在于，每次攪拌萃取時間為1h。

10.如權利要求1中所述的一種提取純化方法，其特征在于，所述步驟（5）中，氯仿層A和氫氧化鈉水溶液的體積比為1~2：1；所述氯仿層A與所述氫氧化鈉水溶液攪拌萃取次數為6-7次，每次攪拌時間為0.5~1.5h。

11.如權利要求10中所述的一種提取純化方法，其特征在于，所述氯仿層A和氫氧化鈉水溶液的體積比為1：1；每次攪拌時間為1h。

12.如權利要求1中所述的一種提取純化方法，其特征在于，所述步驟（6）中，加入氯仿后進行攪拌萃取的次數為3-4次，每次攪拌萃取時間為1h。

13.如權利要求1-12任一項所述提取純化方法，其特征在于，所述純化方法還包括對制備得到的六氫-3-(2-甲基丙基)-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮的檢測方法，所述檢測方法采用氣相色譜-質譜法分析檢測，檢測條件為：DB-1色譜柱，30m×0.25mm×0.25μL；載氣：氦氣；流速：1mL/min，溶劑延遲2.06min；升溫程序：初始溫度為50℃，以2℃/min升溫到60℃，再以30℃/min升到250℃，保持8min；離子化方式：EI，70 eV；離子源溫度：250℃；載氣：氦氣；柱流速：1.0 mL/min。