[發明專利]一株產β-苯乙醇的庫德里阿茲威畢赤酵母菌株及其應用

有效

• 申請號: 201610568829.0
• 申請日: 2016-07-19
• 公開（公告）號: CN107629973B
• 公開（公告）日: 2020-03-20
• 發明（設計）人: 李秀婷;滕超;范光森;孫寶國;孫嘯濤;許岱;富志磊
• 申請（專利權）人: 北京工商大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12P7/22;C12R1/84
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 鄒宗亮;牟科

1.一株庫德里阿茲威畢赤酵母(Pichia kudriavzevii)菌株，其特征在于：該庫德里阿茲威畢赤酵母的菌株名為庫德里阿茲威畢赤酵母Y1511，已于2016年5月31日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC 12567。

2.如權利要求1所述的庫德里阿茲威畢赤酵母Y1511菌株，該菌株的特征是：形狀多為狹長的紡錘體，少量橢圓形，芽殖，菌落顏色為乳白色，能夠利用葡萄糖、麥芽糖、琥珀酸、乙醇、乳酸、核糖、甘油和葡萄糖酸，能利用硫酸銨、乙胺和L-賴氨酸，在不含維生素的培養基上生長，葡萄糖耐受能力大于80 %，在12 %的乙醇濃度下能正常生長，該菌β-苯乙醇耐受濃度為3.5 g/L，最適生長pH和溫度分別為3和35 ^oC，所述庫德里阿茲威畢赤酵母Y1511菌株的26S rDNA D1/D2序列與其它多株庫德里阿茲威畢赤酵母的26S rDNA D1/D2序列有99 %的相似性。

3.如權利要求1或2所述的庫德里阿茲威畢赤酵母Y1511菌株在制備β-苯乙醇中的應用。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，步驟如下：

（1）從斜面上挑取1環庫德里阿茲威畢赤酵母Y1511接入液體種子活化培養基中，在20-40 ^oC、120-240 r/min條件下，活化16-20 h，獲得種子活化液；

（2）將步驟（1）獲得的種子活化液以2-12 %（v/v）的接種量接種于液體發酵培養基，在20-40 ^oC、靜置或120-240 r/min條件下培養48-60 h，即得。

5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述步驟（1）中液體種子活化培養基組分如下：葡萄糖20 g/ L，蛋白胨20 g/ L，酵母浸粉10 g/L，腺嘌呤0.04 g/ L，尿嘧啶0. 02 g/L，pH 5. 5，蒸餾水定容。

6.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述步驟（2）中液體發酵培養基組分如下：葡萄糖20 g/ L，硫酸鎂0.5 g/ L，磷酸二氫鉀5 g/ L，L-苯丙氨酸5 g/ L，初始pH值為自然pH，蒸餾水定容。

7.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述步驟（2）中液體發酵培養基的優化單相組分如下：葡萄糖80 g/ L，硫酸鎂0. 5 g/ L，磷酸二氫鉀5 g/ L，酵母浸粉5 g/ L，L-苯丙氨酸25 g/ L，pH 5，蒸餾水定容。

8.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述步驟（2）中液體發酵培養基的優化兩相組分如下：葡萄糖80 g/ L，硫酸鎂0. 5 g/ L，磷酸二氫鉀5 g/ L，酵母浸粉5 g/L，L-苯丙氨酸10 g/ L，pH 5，蒸餾水定容，后添加液體發酵培養基體積25%-30%的油酸或聚丙二醇2000。

9.如權利要求4所述的應用，其特征在于，采用權利要求6所述培養基，所述步驟（2）中培養溫度為25 ^oC，以210 r/min培養54 h，能夠得到成熟的β-苯乙醇轉化液。

10.如權利要求4所述的應用，其特征在于，采用權利要求7所述培養基，所述步驟（2）中培養溫度為25 ^oC，以210 r/min培養108 h，能夠得到成熟的β-苯乙醇轉化液。