[發明專利]膽汁和血清中熊脫氧膽酸的純化分離和LC?MS/MS檢測

在審

• 申請號: 201610554568.7
• 申請日: 2016-07-14
• 公開（公告）號: CN107621503A
• 公開（公告）日: 2018-01-23
• 發明（設計）人: 朱監寶;官培龍;郭孟磊
• 申請（專利權）人: 上海可力梅塔生物醫藥科技有限公司;上海愛可賽默醫療器械有限公司;廣州可力質譜醫療器械有限公司;江蘇可力色質醫療器械有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司31266
• 代理人: 崔佳佳,馬莉華

1.一種高效液相色譜質譜聯用法檢測試劑盒，其特征在于，包括：

(1)質控品，所述的質控品中含有熊脫氧膽酸和豬脫氧膽酸；

(2)同位素內標提取液，所述的同位素內標提取液包括8種同位素內標CA-d5，DCA-d5，LCA-d4，GLCA-d4，TCA-d4，TLCA-d5，TCDCA-d5，TUDCA-d5；

(3)稀釋液，所述的稀釋液為乙腈；

(4)轉化液，所述的轉化液為PTAD(4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮)；

(5)復溶液，所述的復溶液為甲醇；

(6)流動相添加劑A，所述的流動相添加劑A為飽和一元羧酸；

(7)流動相添加劑B，其中所述的流動相添加劑B為C1-C3胺化合物。

2.根據權利1要求所述的檢測試劑盒，其特征是：所述的流動相添加劑B為甲胺。

3.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于所述飽和一元羧酸為甲酸、乙酸、丙酸、丁酸或其組合。

4.如權利要求3所述的檢測試劑盒，其特征在于所述飽和一元羧酸為甲酸。

5.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于所述飽和一元羧酸為甲醇和乙醇之一或其組合。

6.如權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于所述飽和一元羧酸為甲醇。

7.通過串聯質譜法測定所取的生物樣品中熊脫氧膽酸和或豬脫氧膽酸的量的方法，其包括：

(i)通過利用電噴霧離子源(ESI)對所述熊脫氧膽酸和或豬脫氧膽酸和內標進行電離，分別產生所述熊脫氧膽酸和或豬脫氧膽酸和所述內標的至少一種前體離子；

(ii)分別產生所述熊脫氧膽酸和或豬脫氧膽酸和所述內標的所述前體離子的一種或多種碎片離子；和

(iii)比較步驟(i)或(ii)或兩者中產生的所述熊脫氧膽酸和或豬脫氧膽酸和所述內標的一種或多種所述離子的量以確定所述生物樣品中的熊脫氧膽酸和或豬脫氧膽酸的量；

其中，色譜檢測過程中的流動相中加入甲胺。

8.權利要求7的方法，其中所述熊脫氧膽酸的所述母離子的質/荷比為391.1±0.5。

9.權利要求7的方法，其中所述豬脫氧膽酸的所述母離子的質/荷比為391.3±0.5。

10.權利要求8或9的方法，其中一種或多種碎片離子包括選自質/荷比為391.2±0.5的離子的一種或多種離子。